卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用-生物化工专业毕业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 大连理工大学硕士学位论文摘要 大连理工大学硕士学位论文 摘要 当动物机体受到外来病原菌入侵时，免疫系统被激活以抵御病原菌对机体的伤害。 然而免疫系统的高度活化会导致动物采食量及体重下降等免疫应激现象，这给养殖业造 成巨大经济损失。因此如何缓解免疫应激具有非常重要的实际意义。抗生素可有效改善 动物的生长状况，但随着动物产品中药物残留和细菌耐药性等问题的出现，迫切需要寻 找一种既能有效控制养殖动物疾病，又不带来食品安全问题和环境隐患的新产品以替代 抗生素。研究表明，卵黄抗体可用于动物感染性疾病的防治，因其具有安全、高效、特 异性强等优点，所以被认为是最有前景的新一代绿色、安全型抗生素替代品。然而，关 于IgY的作用机理现在还未阐明，IgY在抑制病原菌的同时，能否对动物机体的免疫系 统起到调节作用，有待于进一步的研究。本课题在前期研究的基础上，通过体内实验分 析IgY对鼠伤寒沙门氏菌攻毒小鼠肠道黏膜各种T淋巴细胞的影响。此外，通过体外 实验还考察了IgY对巨噬细胞吞噬活性和树突细胞成熟度的影响。 IgY对攻毒小鼠肠道黏膜各种T淋巴细胞的影响：昆明小鼠随机分为4组，用链霉 素预处理2 d，12 h后灌胃PBS、非特异性IgY和特异性IgY，持续3 d，在此期间观察 小鼠的状态、死亡率和体重。3 d后解剖小鼠并取小肠，分离肠道派尔淋巴结、上皮层 以及固有层的淋巴细胞，用流式细胞仪检测各种淋巴细胞的数量变化。结果表明，鼠伤 寒沙门氏菌攻毒后，小鼠精神状态萎靡，死亡率达到60％，体重明显减轻，派尔淋巴结 出现肿大，CD3+T细胞和CD8+T细胞分别提高10％和14％。上皮内淋巴细胞出现大量 增加，CD8+T细胞和TCR76+T细胞分别增加18％和16％。固有层中CD4+T细胞和CD8+T 细胞升高8％和12％。口服特异性IgY后，小鼠精神状态好转，死亡率降至20％，但体 重无明显变化。派尔淋巴结肿大状况好转，并且派尔淋巴结中总的T细胞(CD3+T细 胞)降低6．5％，基本恢复到正常水平。特异性IgY还可显著降低上皮层中CD8+T细胞 和TC脚6+T细胞的比例，分别降低12％和10％。固有层中的淋巴细胞在特异性IgY的 作用下，也显著降低，其中CD4+T细胞和CD8+T细胞分别减少7％和12％。这表明， 特异性IgY可缓解鼠伤寒沙门氏菌攻毒引起的炎症反应，对机体起到保护作用。 lgY对巨噬细胞吞噬活性的影响：用FITC标记鼠伤寒沙门氏菌，然后巨噬细胞与 细菌共培养3 h后，检测巨噬细胞的吞噬率及NO的释放量。结果表明，非特异性IgY 和特异性IgY可显著提高巨噬细胞对细菌的吞噬率，分别提高20％和33％。并且特异 性IgY显著减少了巨噬细胞NO的分泌，使NO的分泌量由原先的26 pmol／L降低至14 gmol／L。这表明IgY可增强巨噬细胞对细菌的吞噬率并减少炎症因子的分泌。 IgY对树突细胞成熟度的影响：从小鼠骨髓中分离原代细胞，用10 ng／mL rGM．CSF 和rIL．4诱导分化成树突细胞，收集第7 d的未成熟树突细胞。将鼠伤寒沙门氏菌与未 成熟树突细胞以及特异性IgY共同培养3 h，用流式细胞仪检测树突细胞表面标志的变 万方数据 卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用化。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌攻毒后树突细胞表面标志MHC 卵黄抗体对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠肠道免疫应答的调节作用 化。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌攻毒后树突细胞表面标志MHC II，CD40，CD80，CD83 和CD86分别降低1 1％、3％、4％、5％和5％，而加入特异性IgY后分别升高20％、9％、 11％、15％和5％。这说明攻毒后，鼠伤寒沙门氏菌引起树突细胞的凋亡，而加入特异 性IgY后，可以减少细胞的凋亡并促进树突细胞的成熟。 关键词：卵黄抗体；鼠伤寒沙门氏菌；T细胞；巨噬细胞；树突细胞 万方数据 大连理工大学硕士学位论文Chicken 大连理工大学硕士学位论文 Chicken Egg Yolk Antibodies Modulate the Intestinal Immune Response in Mice Challenged with Salmonella Typhimurium Abstract Pathogen invasion carl induce immune response and activate the lymphocytes and other immune cells，and thus gives rise to the inflammatory response．However,the over activated immune system may cause the reduction