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谢 谢! 放映结束 感谢各位观看! 让我们共同进步 2.2 动物细胞工程 桃源一中 单湘华 2.2 动物细胞工程 单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养?培养时又需要提供哪些必要条件呢? 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 阅读课文44--46面相关内容: 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 动物细胞培养的过程: 原代 1.2 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢,核型可能变化 贴壁生长 接触抑制 10代以内,保持正常二倍体核型 传代培养 原理?: 细胞增殖 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件? 讨 论 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和 动物血清等。 适宜温度、 PH和气体环境; 无菌无毒环境 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 培养器皿 动物细胞培养瓶内表面为什么 要光滑、无毒? 获得细胞 细胞的全能性 细胞或细胞产品 新的个体或细胞产品 培养结果 或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原 理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 大规模的生产有重要价值的生物制品 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体为基因工程技术提供受体细胞 有毒物质的检测细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物等,为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据 动物细胞培养技术的应用 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 动物细胞特点: 分化潜能变窄:随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄,这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性:细胞核,它含有保持物种遗传性所需的全套基因,而且并没有因细胞分化而丢失基因,因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性。 比较植物组织培养和动物细胞培养(原理、培养结果) ? 2.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物) 分 类 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复全能性容易 细胞分化程度高,恢复全能性不容易 2.1 动物细胞核移植概念: 卵黄膜 2.2体细胞核移植的过程: 请看教材P48图2-21 思考: 1.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期? 2.通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎? MⅡ中期卵母细胞 诱导方法:物理或化学方法激活受体细胞,完成细胞分裂和发育进程。 3.原理: 4.为什么选择卵母细胞作为核移植的受体细胞? 细胞核的全能性 卵母细胞体积大、易操作,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 例.在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到( ) A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术 D 供体细胞(供核) 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞(MⅡ中期:供质) 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 共分成两大阶段:核移植和胚胎移植。 你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 克隆动物的性别取
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