三疣梭子蟹卵黄蛋白原的基因克隆及分子特征分析-生物化学和分子生物学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 卵黄蛋白原是一种特异性存在于无脊椎及低等脊椎卵生动物雌 性个体中的蛋白质，是卵黄蛋白的前体。卵黄蛋白是无脊椎及低等脊 椎卵生动物成熟的卵母细胞的主要成分，也是其胚胎发育过程中的重 要营养来源。目前，已有关于卵黄蛋白原在许多物种中的研究报道。 在甲壳类中，迄今为止卵黄蛋白原的研究主要集中在虾类。而在另外 一种具有重要经济价值的甲壳类动物蟹中，有关其卵黄蛋白原的研究 尤其是其分子生物学方面的研究还较少见。本研究通过RT-PCR， RACE等技术克隆得到了三疣梭子蟹卵黄蛋白原的一个基因，该 cDNA序列全长7846bp，含有一个7680bp的开放阅读框，编码一个 含有2560个氨基酸残基的蛋白质。其5’和3’的非翻译区分别为27bp 和139bp。将其开放阅读框翻译为氨基酸序列后进行BLAST，该序 列显示了与其他已知的甲壳类卵黄蛋白原序列32％--75％的相似性。 通过SDS和Western blotting分析，在三疣梭子蟹的卵巢中， 卵黄蛋白主要包含有三个亚基(102kD，100kD和85kD)和一些小 分子量的多肽。通过Northern blotting分析，卵黄蛋白原基因主要在 三疣梭子蟹的肝胰腺内表达，而且随着它的不同发育时期，肝胰腺内 的表达特征有显著的变化。另外通过RT-PCR检测，发现在卵巢中也 有卵黄蛋白原的表达。 关键词：三疣梭子蟹；卵黄蛋白原