啤酒花提取物中总黄酮的含量测定方法.DOCVIP

啤酒花提取物中总黄酮的含量测定方法 仪器与试剂 紫外分光光度计 芦丁对照品 乙醇,醋酸,醋酸钠,三氯化铝 醋酸-醋酸钠缓冲液(ph 4.5):准确称取醋酸钠1.8g,加入醋酸0.98ml,加水溶解定容100ml混匀即可. 三氯化铝试液:准确称取三氯化铝2.41g,加水溶解定容至100ml混匀即可. 溶液的制备: 1.对照品溶液的制备:精密称取102℃减压干燥的芦丁对照品约20mg于100ml的容量瓶中,加70%乙醇溶液定容,即为对照品溶液. 2.样品溶液的制备:精密称取植物提取物适量于100ml容量瓶中,加入80ml70%乙醇,超声提取30min,冷却至室温,定容,摇匀,过滤,取续滤液,即为样品溶液. 三.测定步骤: 1.标准曲线的绘制:精密吸取芦丁对照液0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml,1.0ml于10ml的容量瓶中,加醋酸-醋酸钠缓冲液2ml,0.1mol/ L三氯化铝0.2ml,摇匀,加70%乙醇溶液稀释至刻度,在270nm以试剂为空白测定吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标坐标准曲线. 2.样品测定:取样品续滤液1ml于10ml容量瓶中,按工作曲线项下”加醋酸-醋酸钠缓冲液起”,依法测定吸光度,从工作曲线上读出样品溶液中芦丁的浓度,按下式计算含量: C×100×10 X(%)=100× W 式中:C-从工作曲线上读出样品溶液中芦丁的浓度 W- 样品称样量