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FISH实验室质控标准初稿 一：温度控制： ①：水浴锅的温度每周记录并用温度计测量其温度显示是否正常。 ②：考普林瓶使用时加盖，保证瓶内温度均一，稳定。 ③：杂交仪工作时保证密封状态。 ④：试剂冰箱，标本冰箱的温控。 二：时间控制： ①：低渗时间控制，足够的低渗时间才能让细胞核展开，利于杂交。如遇到羊水标本有少量木血污染，应将低渗时间缩短，让胎儿上皮细胞与母体血细胞容易区分（区分方法：（1）：核形态的区分，上皮细胞细胞核呈不规则的椭圆形，血细胞核呈规则圆形。二：在低渗20min的情况下，上皮细胞能观察到带膜，血细胞为裸核状态。） ②：2XSSC浸泡时间控制，时间过长：容易掉片。 时间过短：起不到洗涤，缓冲的作用，不利于信号杂交。 ③：烤片的时间控制：时间过长：DNA降解，信号杂交不上（石蜡样本不受影响）。 时间过短：掉片。 ④：胃蛋白酶工作液或PK工作液的时间控制：时间过长：消化过度，呈空核。 时间过短：消化不完全，信号不易杂交。（尤其石蜡组织切片时PK工作液的消化时间控制，因为每次切片的厚度不一样，所以容易消化过度，或者消化时间不足，一般做2-3张片子梯度消化，并最好用胃蛋白酶工作液代替PK工作液，） ⑤：NP-40洗涤时间控制。 三：试剂控制：比如新配的20XSSC 0.1%NP-40/2XSSC 2XSSC保存6个月， 1M Hcl保存一个月。 四：暗室控制，实验的大多部分以及阅片均应在暗室下进行，不让会让探针荧光信号猝灭。 五：滴片的控制：滴片浓度不宜过稀（难以找到足够符合计数要求的细胞）。不宜过密（细胞核重叠，不能计数）。 六：其他质控：如玻片的洁净度（防止背景过强），离心转速（过大的转速能使为固定的细胞形态发生改变，尤其是在低渗后，细胞核膨胀，比较脆弱。）