山核桃蒲壳总生物碱的提取纯化及细胞毒性研究-药物分析学专业论文.docxVIP

浙 江 浙 江 大 学 硕 士 学 位 论 文 摘 要 摘 要 本 文 以浙 江 临 安 产 山核 桃 ( Ca 尽a cathay ensis sa rg.) 蒲 壳 为研 究对 象 ， 旨在 对 其 中药用价值 较 高 的 生物碱 成分 进 行 提 取 与纯化 工 艺及 细 胞 毒 性 的研 究 ，为 进 一步 的开 发 利用 提 供 科 学 依 据 。 本 论文采 用传 统 浸提 法 、超 声辅 助提 取 法 、微 波辅 助 提 取 法 从 山核 桃 蒲 壳 中提 取 生 物碱 成 分 ， 以总 生 物碱 得 率 为 指 标 ，分 别 通 过 正 交 试 验 考 察 最佳 工 艺 ， 并 将 三 种 提 取 方 法 的 最佳 工 艺进 行 了对 比 ， 结果 表 明微 波辅 助 提 取 法 的提 取 率 高 于 传 统 浸 提 法和超 声辅 助提 取 法 ，最终确 定 提 取条 件 为 : 室 温浸 泡 24h ， 乙醇 浓度 6 0% ，微 波 时 间 7m in，微 波 功 率 520 w ，微 波 温度 为 30 ℃ ， 生物 碱 得 率 为 0.94 % 。 利 用 大 孔 树 脂 对 总 生物碱 进 行 纯 化 。通 过 静 态试 验 从 三 种 树 脂 (D 101 、N K A 一9 、 A B 一8 ) 中筛 选 出适 合 纯 化 山核 桃 蒲 壳 生 物碱 的树 脂 种 类 ，研 究 结果 表 明 ，N K A 一9 型 树 脂 综合 性 能 最 好 。 论 文 进 一 步 通 过 单 因 素 实 验 和 正 交 实 验 优 化 了纯 化 工 艺 参 数 ，包 括 上样 液 p H 、洗脱 液 浓度 和 洗 脱 液 用 量 三个 因素 。以生 物碱 的纯 化倍 数 和 固 体 得 率 为指标 ，通 过 极 差分析和 方 差 分 析 ，最终 确 定 纯 化 工 艺为 上样 液 pH 为 7.0 ， 乙醇 浓度 为 50% ， 乙醇 用 量 为 3B V ， 在 此 工 艺下 生 物碱 纯 化倍 数 达 3.173 倍 ， 固体 得 率 为 34 .78 % 。 本论文采用 M T T 细胞 计数 法 对 山核 桃 蒲壳 总生物碱 进 行 细 胞毒性研 究 。 以细 胞 增 殖 抑制 率 为 指 标 ，探 讨 了总 生 物 碱 对 H eP G 一2 、K 56 2 、B cap 一37 的增 殖 抑 制 作 用 及 形 态 的影 响 。结 果 表 明: 山核 桃 蒲 壳 总 生 物碱 对 H eP G 一2 、K 562 、B cap 一37 的 增 殖 有 明 显的抑 制 作 用 ，对 H eP G 一2 细 胞 的抑 制作 用 最为 明 显 。IC S。分 别 为 : 86.6u g/m L 、 2 9 3 .4u g/m L 、 15 2 .6u g /m L 。 关键 词 : 山核桃蒲壳，总生物碱，大孔树脂，细胞毒性 浙 江 浙 江 大 学 硕 卜学 位 论 文 A b s tr a e t A b s t r a e t In o rd e r to f in d th e o P tim u m e x tra e tio n a n d P u rif ie a tio n te e h n iq u e s a n d its e y to to x ie ity ，w e stu d y o n th e a lk a lo id s f ro m th e P e e ls o f C a z〕夕a e a th a y e n sis S a rg . to P ro v id e a se ie n tif ie b a s is f o r th e f u r th e r e x P lo ita tio n a n d u tiliz a tio n . T r a d itio n a l im m e rs io n e x tra e tio n m e th o d w a s e o m P a re d w ith u ltra so n ie 一a s sis te d e x