利用玉米秸秆制取燃料乙醇的关键技术研究-生物化工专业论文.docx

浙江大学博士学位论文利用重组酵母＆cerevisiae 浙江大学博士学位论文 利用重组酵母＆cerevisiae ZU-IO在厌氧条件下对玉米秸秆纤维素、半纤维 素水解液中的葡萄糖和木糖进行共发酵，66．9 g／L葡萄糖和32．1 g，L木糖发酵生 成41．4 g／L乙醇，对葡萄糖和木糖的乙醇得率达到0．418。由于重组酵母＆ cerevisiae ZU．10对半纤维素水解液中木糖的有效转化，从而使得乙醇产量相比 普通酿酒酵母发酵增加了24．2％。 为消除糖化过程中产物的反馈抑制，采用同步糖化发酵工艺，将纤维素和半 纤维素的糖化与重组酵母对水解液中葡萄糖和木糖的共发酵相结合。研究表明， 纤维素和半纤维素水解产生的葡萄糖和木糖被重组酵母cerevisiae ZU-IO快速 利用，有效解除了葡萄糖对纤维素酶的反馈抑制，从而提高了底物的乙醇转化率。 鉴于重组酵母生长缓慢，生长阶段好氧、发酵阶段厌氧的特性，采用海藻酸 钙凝胶包埋法固定重组酵母。利用固定化细胞发酵木糖，同游离细胞相比，固定 化细胞的发酵周期由96h缩短至60h，对乙酸的耐受性由O．259／L提高到1．29／L， 对糠醛的耐受性由O．08 g／L提高到0．12 g／t,，而且细胞易于重复利用。利用固定 化细胞重复12批发酵玉米秸秆水解液，葡萄糖利用率均为100％，木糖利用率均 在90％以上，平均乙醇浓度为40．4 g／L，对葡萄糖和木糖的平均乙醇得率为0．4l。 将氢氧化钠预处理后残渣中纤维素和半纤维素的乙醇转化、碱处理液中木质 素的回收、碱溶性半纤维素糖类的回收利用进行有机整合，从而实现玉米秸秆各 组分的综合利用。对利用玉米秸秆生产燃料乙醇的关键技术进行集成优化，现已 在河南天冠燃料乙醇有限公司建成年产300吨纤维乙醇的示范生产线，为进一步 实现纤维乙醇的产业化生产奠定了扎实的基础。 本文在基因重组酵母对葡萄糖和木糖的共发酵、利用基因重组酵母厌氧条件 下发酵玉米秸秆纤维素和半纤维素水解液生产乙醇、以及利用木质纤维原料生产 乙醇的关键技术集成等方面的研究具有明显的特色与创新，相关研究结果不仅有 一定的学术价值，而且在促进可再生木质纤维素资源的转化利用、缓解人类的粮 食危机、降低燃料乙醇的生产成本等方面具有重要的现实意义。 关键词：玉米秸秆，预处理，酶水解，纤维素酶，纤维二糖酶，乙醇发酵，基因 重组酵母，木糖，同步糖化发酵，固定化细胞，木质素，技术集成 浙江大学博士学位论文Abstract 浙江大学博士学位论文 Abstract Lignocellulosic biomass is a cheap，renewable，abmadantly available fesourcc， and its bioconversion to fuel ethanol is very meaningful in the sustaining development of oBr society and economy．In this dissertation,key tcchnologies in ethanol production from lignocellulosic biomass including pretrcatment．enzymatic hydrolysis of cellulose and hemicellulOse,ethanol fermentation from hexose and pentose，and comprehensive utilization ofiignocelhilosic feedstock were investigated． Corn stover was pretreated by dilute acid，aqueous ammonia／dilute acid，lime， and sodium hydroxide,respectively,for enhancing the enzymatic suaceptibility of substrate．Pretreatment埘tll 2％NaOH at 85℃for 75 min removed 73．9％liguln and almost all the acetate from the raw material，and the deligifled cortl stover residues were readily to degrade by cellulase complex．The alkaline liquor separated from the reaction mixture could be recycled for 3--4 times in repeat