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[理清——知识联系]
[记清——主干术语]
1.基因工程操作中用到的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。
2.限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割。
3.质粒是常用的载体,它是一种小型的环状DNA分子,具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。
4.基因工程的基本操作程序:目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
5.基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
6.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,导入动物细胞常用显微注射法,导入微生物细胞常用感受态细胞法。
7.检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因常用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否进行了转录同样是采用分子杂交技术,检测目的基因是否翻译成蛋白质常用抗原—抗体杂交技术。
8.蛋白质工程的操作过程:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。
9.植物组织培养的基本过程:
外植体eq \o(―――→,\s\up7(脱分化),\s\do5( ))愈伤组织eq \o(―――→,\s\up7(再分化),\s\do5( ))根、芽→植物体。
10.植物体细胞杂交需要用酶解法制备原生质体,所用的酶包括纤维素酶和果胶酶。
11.人工诱导原生质体融合的方法分为物理法和化学法,物理法包括离心、振动、电激等,化学法一般用聚乙二醇作为诱导剂。
12.动物细胞培养需满足的条件有充足的营养、适宜的温度和pH、气体及无菌、无毒的环境。
13.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,并可以大量制备的优点。
14.诱导动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。
15.早期胚胎发育的过程:受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。
16.胚胎的早期培养所需培养液的成分包括:无机盐、有机盐(两盐);维生素、激素(两素);氨基酸、核苷酸(两酸)以及水、血清等。
17.胚胎移植的基本程序:对供、受体的选择和处理→配种或进行人工授精→对胚胎的收集、检查、培养或保存→胚胎移植→移植后的检查。
18.胚胎移植过程中两次使用激素,第一次用孕激素对供、受体进行同期发情处理,第二次用促性腺激素对供体进行超数排卵处理。
19.生态工程建设的目的是遵循自然界物质循环的规律,充分发挥资源的生产潜力,防止环境污染,达到经济效益与生态效益的同步发展。
20.生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理及系统学和工程学原理。
[澄清——思维误区]
关注点1 对基因工程中的“载体”与细胞膜上的“载体”区分不清
[澄清] 基因工程中的载体是DNA分子,其功能是携带目的基因进入受体细胞;细胞膜上的载体是蛋白质,其功能是协助某些物质进出细胞。
关注点2 误认为限制酶是一种酶
[澄清] 限制酶是一类酶,而不是一种酶。
关注点3 误认为启动子是起始密码子(RNA),终止子是终止密码子(RNA)
[澄清] 启动子(DNA片段)≠起始密码子(信使RNA上的三个相邻碱基);终止子(DNA片段)≠终止密码子(信使RNA上的三个相邻碱基)。
关注点4 对蛋白质工程的实质与基因工程的实质认识不清
[澄清] 蛋白质工程是定向改造或生产人类所需蛋白质(可以为自然界中不存在的蛋白质),而基因工程是定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品(一般生产自然界中已存在的蛋白质)。
关注点5 误认为植物组织培养产生新个体属于有性生殖
[澄清] 植物组织培养产生新个体不属于有性生殖,而属于无性繁殖,细胞分裂方式为有丝分裂,包括脱分化和再分化两个阶段。
关注点6 误认为获取细胞产品与人工种子的时期相同
[澄清] 获取细胞产品的时期应为脱分化之后再分化之前的愈伤组织,而制作人工种子需要在再分化后形成的胚状体阶段。
关注点7 对植物组织培养与动物细胞培养的区别不明
[澄清] (1)植物组织培养和动物细胞培养都存在细胞的培养过程,但植物细胞可以先分裂再分化,而动物细胞只分裂不分化。
(2)植物组织培养可以培养成新个体,动物细胞培养只能培养出一团细胞,不能培养成一个新个体。
关注点8 对受精标志与受精完成的标志认识不清
[澄清] (1)卵子是否受精的标志是第二极体的形成(即在透明带和卵细胞膜间隙观察到两个极体)。
(2)受精完成的标志是雌雄原核融合成含二倍染色体的合子。
关注点9 误认为胚胎发育的过程中,细胞的全能性完全相同
[澄清] 胚胎发育的过程中,细胞的全能性并非完全相同,桑椹胚阶段的细胞具有全能性,囊胚是开始分化的阶段,原肠胚时期已出现高度分化。随着个体的发育,细胞的全能性越来越低。
关注点10 对胚
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