血小板检查培训课件.pptVIP

形态检查内容 ①血小板大小：有无巨大血小板或小型血小板； ②形态：胞质的颜色，颗粒有无、分布、粗细，空泡； ③PLT分布。 * (一)正常形态 1.5~3μm，呈圆形、椭圆形、逗点形或不规则形；胞质呈淡蓝或粉红，中心有若干细小紫红色颗粒，无细胞核，血片上3~5成群。 * 血小板 （血涂片） * * (二)异常形态 1、大小异常 （1）大血小板：直径4~7μm，巨型血小板直径7.5μm。见于ITP、巨大血小板综合征、脾切除等。 （2）小血小板：直径1.5μm，主要见于缺铁贫、再障等。 * 巨大血小板 * 2.形态异常 （1）幼稚形：颗粒少。 （2）老年形:边缘不规则，颗粒粗，呈离心分布，有空泡。 （3）病理幼稚形：体积大，胞质淡蓝，几乎无颗粒。 * （4）病理刺激形：体积增大，形态不一，胞质呈淡蓝/紫红，颗粒多而大小一致。 （5）退化形：大小、形态不一，有大空泡，无颗粒或颗粒聚集。 正常人异常plt2%，异常plt10%才有意义。 * （6）血小板卫星现象：血小板粘附、围绕于中性粒细胞（或偶尔粘附于单核细胞）的现象。偶见于EDTA抗凝血血涂片中，导致血液分析仪PLT减少。 （7）血小板“粘附”红细胞： * 3.分布异常 （1）plt单个散在，不聚集：见于血小板无力症、再障、ITP等。 （2）plt过度聚集：见于原发性plt增多症，骨髓纤维化等。 * 血小板检查 检验系临检教研室 陈丽华 * 目的要求 掌握：血小板计数的原理、、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义。 重点 : 血小板计数 难点: 血小板形态 * 一、概述 * （一）血小板的生成 造血多能干细胞 TPO调控 分化 原巨核细胞 促进巨核细胞祖细胞增殖、分化、成熟与释放plt 进入血液 Plt 2/3在循环血，其余贮存于脾。 * （二）血小板的破坏 血小板的平均寿命为7~14天，具有止血功能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细胞破坏，主要在脾破坏。 脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞留现象即“脾池化”，脾池中的血小板和循环池中的血小板可以互换。 * （三）血小板检测常用项目 1、血小板计数 （PLT）:手工单项或血液分析仪多项检测 2、血小板平均体积（MPV） 3、血小板分布宽度(PDW) 4、血小板比积(PCT) 血液分析仪测 * 二、血小板计数（手工法） * （一）原理 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数，计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏RBC, 固定Pt并防止聚集。 * （二）器材 光学显微镜；血球计数板、Hb吸管、试管、采血针等。 （三）试剂：下列试剂任选一种 1.草酸铵稀释液：草酸铵1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸馏水加至100mL.首选试剂。 2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤冰箱保存。 * （四）操作 1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL。 2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。室温放置10分钟。 3.充池，静置10~15分钟。 4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共5个中方格内的plt数。 * （五）计算 血小板数/L=5个中方格内血小板数（N） ×5×10×20×106/L =5个中方格内血小板总数×109/L （六）结果报告 PLT:△△△ ×109/L * （七）注意事项 1.全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防菌，以免计数时误认。 2.针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。 3.同时做多项检查时，优先采plt计数之血。 4.充池前应充分摇匀，充池后需静置10分钟以上待plt全部下沉后再计数。1h内完成。 * （八）方法学平价 1.草酸铵法对RBC破坏力强，使视野清晰，plt形态清楚，是全国临床检验操作规程推荐方法。由于Plt体积小，易粘附、聚集及破坏等，结果不甚理想。 2.复方尿素法优点是plt胀大易辨认，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，试剂保存时间短。 * 3.血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物，故计数误差大。当直方图出现变化时，应用显微镜计数法校准之。 * 4.流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色标记血小板，根据荧光强度和散射光强度，用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小板计数参考方法。 * 5.相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立体感增强，有助于识别血小板，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。 （九）参考值：（1