杀虫剂和植物次生物质对棉铃虫酪氨酸酶的作用及二化螟对Bt毒素的敏感基线研究-昆虫学专业论文.docx

摘要用双光束扫描分光光度计的时间驱动程序，测定酶反应速度。研究了几种化学农药、植 摘要 用双光束扫描分光光度计的时间驱动程序，测定酶反应速度。研究了几种化学农药、植 物次生物质和特异性抑制剂对棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hcibnar))酪氨酸酶tyrosinase的 酶促抑制动力学。结果表明：某些有机磷化合物和植物次生物质对棉铃虫酪氨酸酶有抑制作 用。辛硫磷phoxim、对硫磷parathion、芸香苷rutin、单宁taninic acid和苯基硫脲phenyl thiourea(PTU)的抑制中浓度15。分别是0．0386、0．0599、0．451l、1．5018、o．5288mM和4．2609 nM。辛硫磷、对硫磷和芸香苷对棉铃虫酪氨酸酶的抑制作用，随着抑制时间的延长而增加． 而苯基硫脲和单宁的抑青n作用则无明显变化。辛硫磷、对硫磷、芸香苷和苯基硫脉对棉铃虫 幼虫酪氨酸酶抑制为混合型抑制，双分子速率墨分别为1634．39、40．81、53．6l和2．03x10 M-I．rain一，而单宁为反竞争性抑制。其冠为32．24M-1．rain～，表明，苯基硫脲和辛硫磷对酪 氨酸酶的亲和抑制能力与其它相比较强。可见，棉铃虫的酪氨酸酶可以作为农药对害虫作用 的新靶标进行开发研究。 以邻苯二酚为底物，研究了4种植物次生物质(槲皮素querctin、单宁酸、芸香苷和J 2．三十烷酮2-tridecanone)、L．抗坏血酸L-ascorbic acid(Vc)、硫代硫酸钠Na2S203和苯基硫 脲对棉铃虫幼虫酪氨酸酶二劭氧化酶话性韵影响。结果表明；在测定的浓度范围内，槲皮素 和2．三十烷酮对酪氨酸酶没有直接影响，然而存在一个反应滞后期，该滞后期的长短于槲 皮素和2．三十烷酮的浓度有关，它们的浓度升高反盅的滞后期延长，反之则缩短。槲皮素 和2．三十烷酮对棉铃虫酪氨酸酶反应的影响同V℃对该反应的影响是一致的，它们将反应产 生的o．醌还原为邻苯二酚。 为比较在使用Bt(BacillusthuHngiensis)生物农药及其产品后，二化螟c佟洳suppressalis (Walker)对Bt毒素CrylAc和CrylAb的敏感性变化，我们建立了二化螟在中国稻区对这两 种Bt毒素的敏感性基线。采集中国水稻主产区的12个种群二化螟，测定了所有种群对 CrylAc、8个种群对CrylAb的敏感性基线。研究表明：二化螟初孵幼虫对CrylAc的LCso 为15～157 mg(AI)／L，变化范围为10倍左右；CrylAb的LCs0的2～34 mg(AI)／L，变化范 围在15倍左右。对所测定的CrylAb比对CrylAc较为敏感。经过对两种毒素都测定的8个 种群的LC，。值进行相关性分析，结果表明，_二化螟对这2种毒素的敏感性早止相关，相关 系数为r=O，8267(P=0．0114)其相关性显并。 分别用水稻苗、茭白及稻苗与荸荠三种方法，日挺饲二化螟初孵幼虫，比较室内三种饲养 分别用水稻苗、茭白及稻苗与荸荠三种方法，日挺饲二化螟初孵幼虫，比较室内三种饲养 方法对二化螟生＆发育和繁殖力的影响，从而为二化螟的突验室饲养提供方法和依据。其中， 在整个幼虫期用茭白饲养的二化螟幼虫发育历期和化蛹历期最短(分别为17．8±0．5d和9．8 ±o．8 d)，而用水稻苗饲养的二化螟幼虫发育历期和化蛹历期最长(分别为30．4±1．2 d和 20．o士1．6 d)。水稻苗喂饲二化螟的雌雄蛹的比例较低．仅为O．44，荸荠有利于雌性个体的分 化．用水稻与荸荠相结合喂饲二化螟的雌雄蛹比例为1．18，用荸荠喂饲后化的蛹最重(雌嗣l 雄蛹重分别为71和5ling／头)。三种饲养方法对二化螟的产卵率和孵化率无显著影响，但是， 用水稻饲养二化螟蛹的羽化率比其它两种饲养方法显著降低。由此可见，用茭白和水稻苗荸 荠饲养方法进行二化螟饲养是切实可行的，它们有利于二化螟的生长发育。 以幼虫期、化蛹期、性比、化蛹率和蛹重为指标，分别用稻苗饲养法和稻苗与荸荠饲养 法，研究二化螟密度对其生长发育的影响．同时研究了不同寄主植物对二化螟生长发育和雌、 雄幼虫的化蛹时间进程的影响。结果表明：饲养密度对二化螟的生长发育没有显著影响t而 寄主植物的影响差异显著，稻苗和荸荠结合有利于幼虫的生长发育；取食菱白后，二化螟雌、 雄虫化蛹时间存在显著差异。前期雄蛹多，后期雌蛹多，面取食水稻与荸荠的二化螟的化蛹 进程无显著差异。 关键词：酪氨酸酶。酶动力学。还原剂。植物次生物质，有机磷农药，苏云金杆菌，抑制剂， 棉铃虫，二化螟，饲养技术，寄主植物，敏感性。密度，性比，生长发育，中国 Keywords：tyrosinase，enzyme kinetics，reducing agenL plant a