澜沧江老挝纹胸鮡遗传结构分析-渔业资源专业论文.docxVIP

㈣Y ㈣Y 洲2 ㈣0 ㈣0 Ⅲ4 ⅢⅢⅢ4_ m8 Ⅲ9 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 是否保密 否 如需保密，解密时间 年 月 日 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果々尽我所知。除了文中特别加以标注和致谢的地方外．论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果．也不包含为获得华中农业大学或其他教育机掏的拳位 或证书面使用过的材料。指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中傲7明确的说明。并表示7谢意。 研究生签名： 金营 时闻：2。11年 p石月以目 学位论文使用授权书 本人完全7解华中农业大学关于保存．使用学位论文的艇定．即学生必须按照 学校要求挺交学位论文的印崩本和电子版本：学校有权保存提交论文的印尉版和电 子版．并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描筹复饲手段保存． 汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文(即涉及技术秘密．商韭秘密或申谴专稠等潜在需要提交保密的 论文)在解密后蠡用于本授权书· 学位论文作者签名：金萤 导师签名：了?万毫萝≥ 签名日期：力¨年“月口z日 签名舄期：．p，7年5月2日 l l 澜沧江老挝纹胸觥遗传结构分析目录 澜沧江老挝纹胸觥遗传结构分析 目录 摘要 I Abstract ．．．． ． nl 第一章研究综述 1分子标记 1．1分子标记的种类 2 1．2微卫星DNA标记 。2 1．2．1微卫星DNA结构 ．．2 1．2．2微卫星DNA标记的的优点 ．．3 1．2．3微卫星DNA的多态性形成机理 。3 1．2．4微卫星DNA标记的的功能 j ．．4 1．2．4．1微卫星DNA标记技术在渔业中的应用 4 1．2．4．2种群遗传分析 4 1．2．4．3遗传基因连锁图谱的构建 5 1．2．4．4亲子鉴定和血缘关系分析 5 1．2．4．5人工增殖放流效果评价 6 1．3动物线粒体DNA 7 1．3．1动物线粒体DNA的结构 ．7 1．3．2线粒体DNA遗传规律 ．8 1．3．3线粒体DNA标记技术在鱼类上的应用 ．．8 1．3．3．1分子地理学(Molecular Biogeography) ．8 1．3．3．2起源、分化和扩散 一9 1．3．3．3分子系统发育 。10 1．3．3．4类群识别 10 2老挝纹胸鱿研究概况 ll 2．1地理分布 ．11 2．2生物学特性 ．1 1 华中农业大学201 华中农业大学201 1届硕j：毕业论文 2．3老挝纹胸铫现状及研究意义 ．12 第二章老挝纹胸觥线粒体DNA遗传多样性分析 1引言 2材料和方法 ． 2．1材料 ．．13 2．2主要仪器 ．15 2．3主要试剂及溶液配制 ．．1 5 2．4研究方法 16 2．4．1基因组DNA制备 1 6 2．4．2基因组DNA的检测 16 2．4．3 PCR扩增 ．．17 2．4．4 PCR产物的检测 17 2．5数据分析 l 8 3结果 ．．．．．．．． ．．．． ． ．18 3．1线粒体DNA Cytb基因 ．1 8 3．1．1序列变异与多样性 1 8 3．1．2种群遗传结构 ： ．．19 3．1．3种群历史 一22 3．2线粒体DNA控制区 ： ．．23 3．2．1序列变异与多样性 。23 3．2．2种群遗传结构 24 3．2．3种群历史变动分析 一28 4讨论 29 4．1老挝纹胸】鸶15 mtDNA遗传多样性及结构 一29 4．2种群分化分析 一30 4-3种群保护建议 ．30 第三章老挝纹胸鱿微卫星标记的分离与遗传多样性分析 3．1前言 ．．3 1 澜沧江老挝纹胸觥遗传结构分析3．3 澜沧江老挝纹胸觥遗传结构分析 3．3 DNA的提取 3 1 3．4微卫星DNA富集文库的构建 ．．3l 3．4．1基因组DNA的酶切 ．3l 3．4．2连接反应 32 3．4．3 PCR扩增及产物回收 ．．32 3．4．4含微卫星DNA序列片段的富集 33 3．4．5 PCR扩增片段的克隆 一35 3．4．6阳性克隆的筛选 36 3．4．7测序结果分析及微卫星DNA序列统计 ．37 3．4．8微卫星引物的设计及筛选 ．．38 3．5群体分析 38 3．6 PAGE电泳及银染检测 ．39 3．7数据处理 I 39 3．8结果 ．39 3．8．1阳性克隆的测序结果及序列特征 ．．39 3．8．2多态微卫星引物 39 ’3．8．3微卫星座位上的PCR扩增与变异 39 3．8．4微卫星位点的遗传多样性 ．．40 3．8．5群体内遗传结构分析 43 3．9讨论 ．z抖 3．9．1微卫星序列