乐果对热应激蛋白70的影响-卫生毒理学专业论文.docxVIP

文中丰要缩略语OPs(o瑶a110phosphoms 文中丰要缩略语 OPs(o瑶a110phosphoms Pestieides) 有机磷农药 HSP70(He乱Shock Proteln 70) 热应激蛋白70 A(=hF(Acety】ch01inesterase) 乙酰胆碱酯酶 SOD(Superoxide dismutase) 超氧化物歧化酶 FCM(Flow cytometry) 流式细胞仪 PBL(Peripheral Blood Lymphocyt。) 外周血淋巴细胞 复旦大掌硕士学位论文 复旦大掌硕士学位论文 中文摘要 乐果对热应激蛋白70的影响 中文摘要 生物监测是职业卫生工作的重要内容之一，监测的目的是了解毒物进入机体 的相对量及其生物效应剂量，是职业性有害因素评价的重要组成部分，它以评价 接触者接触水平为中心，进而可以估计工作环境的质量状况。生物监测中指标的 选择是首要的。在对有机磷农药职业接触者的生物监测中，通常采用乙酰胆碱酯 酶(AchE)作为监测指标，但许多研究均表明AChE只适川r急性中毒病例，对 ，慢性低剂量暴露所致的远期效应并不敏感。近年来，有学者提出热应激蛋白 (HsPs)作为评价指标在职业医学中的应用。本课题以乐果作为有机磷农药的 代表，通过人群研究及体外试验，研究了乐果职业接触者外周血淋巴细胞HSP70 基础水平和诱导水平及可能的影响因素，乐果引起热应激蛋白70(HsP70)变化 的规律以及HSP70可能具有的保护作用，并与传统指标迸干iJ：比较，初步探讨了 将HsP70应用于有机磷农药生物监测的可能性。 人群研究 利用流式细胞术检测研究人群外周向淋巴细胞HSP70碡础水平，分析可能 影响因素，与传统指标相比，探查HSP70敏感性，并进，步探讨淋巴细胞在体 外经乐果诱导后HsP70变化规律及可能意义。 1．影响乐果接触工人外周血淋巴细胞HSP70基础表达的因素 与对照组相比，乐果接触工人外周血淋巴细胞HSP70水平升高，AchE活性 降低。不同工种接触者，在年龄、工龄、健康状况分布无明显差异的情况下，包 装i二HSP70水平高f操作工，但AChE活性无显著差异。多儿线性回归分析显 示，埘乐粜接触[人外周血淋巴细胞HsP70表达具有影【1lH的因素，按其程度大 小依次为：健康状况、环境浓度和工龄。健康状况异常，明：境浓度增高或是工龄 增加均能使HSP70水平升高。三者共可解释HsP70约88％晌变异。对AChE活 性彳j‘影响的闪素仅有—[龄，随着』_T龄增加，AchE活性略仃I，h佣工龄仅能解 释AchE活性12％的变异。因此认为HSP70比ACllE史能敏感地反映乐果接触 1人内外环境的综合情况。 2．乐果对体外培养人外周血淋巴细胞HSP70表达的影响 复旦大掌硕士掌位论文 复旦大掌硕士掌位论文 中文摘要 不同人群的外周血淋巴细胞在体外经乐果诱导后，HSP70的变化也不一样。 对照组经诱导后HsP70升高幅度高于接触组：在接触组中，操作工HsP70诱导 后升高幅度高于包装工。多元线性回归分析显示，环境浓度和工龄均可影响 HSP70经诱导后的变化率，环境浓度的升高或工龄的增加都可使HSP70诱导后 变化率降低。本试验结果提示，HSP70诱导后升高的幅度可能反映了乐果的接触 量及工人的应激能力。 体外试验 以神经胶质瘤细胞u87作为神经胶质细胞模型，以AChE及SOD活性为参 照，研究乐果引起HSP70变化的规律以及HSP70具有的保护作用。 1．乐果对U87细胞HsP70表达及AchE、SoD活性的影响 乐果染毒2h，AchE活性无显著变化，sOD活性仅在最高剂量组(100岬ol几) 出现抑制，而HsP70除最低剂量组(O．0l“moI／L)外，其余各剂量组均有显著升 高。染毒4h，AChE及SOD活性在剂量较高的前三个组出现抑制，HSP70在各 剂量组均有升高。HSP70在各剂量组的升高可持续至染毒16h，AChE活性在各 剂量组的抑制仅出现在染毒8h，SOD活性在最低剂量组始终未出现抑制。在有 显著变化的时问及剂量组，HsP70的变化幅度明显高于AchE及s0D。因此， 从时间、剂量、变化幅度三方面综合考虑，HSP70比AChE及sOD敏感。另外， 在染毒2h及4h，HSP70的变化与乐果之间存在剂量．反应关系。 2．HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用 预先给予u87细胞43。C热应激lh，以最高剂量乐果进行4、8、16h染毒， 测AChE及soD活性，发现两者较未经热应激处理组相比均有显著升高，随染毒 时删增加升