第三节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 一、蛋白质的理化性质 (一)蛋白质的两性电离 (二)蛋白质的胶体性质 (三)蛋白质的变性、沉淀和凝固 (四)蛋白质的紫外吸收 (五)蛋白质的呈色反应 (一)蛋白质的两性电离 蛋白质是由氨基酸构成的,其两端及侧链都含有可解离的酸性基团或碱性基团,因此在不同pH的介质中,蛋白质的带电状态就不同。 蛋白质的等电点(pI) 概念:当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 pI是蛋白质的特征性常数。 利用蛋白质两性电离的性质,可通过电泳、离子交换层析、等电聚焦等技术分离蛋白质。 pH pI 带负电荷 pH pI 带正电荷 体内多数蛋白pI为5.0左右 , pH为7.45 时 多数蛋白带负电荷。 如pI 偏于碱性-碱性蛋白质 鱼精蛋白 组蛋白 如pI 偏于酸性-酸性蛋白质 胃蛋白酶 丝蛋白 (二)蛋白质的胶体性质 颗粒大小:在1~100nm之间。属胶体。因此溶于水,成为亲水胶体。 稳定亲水胶体的因素: 水化膜 表面电荷 不通透性:半透膜 毛细血管壁 (三)蛋白质的变
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