辣椒果实胎座特异表达基因启动子序列的克隆及功能分析-生物化工专业论文.docxVIP

r海人学颂I。学位论文摘 r海人学颂I。学位论文 摘 要 辣椒是一种风味蔬菜，不仅可以鲜食而且可加工成辣椒粉、辣椒酱等。此外， 从辣椒中提取的辣椒素类物质还可以用作生化农药、医药中的镇痛剂等。辣椒素 合成途径相关基因启动子的克隆与功能分析，不仅有助于从基因角度了解辣椒素 类物质的代谢过程，并能够为实现基因调控辣椒素的生物合成提供必要的基因元 件，具有十分重要的理论意义及应用前景。 目前，韩国及美国的科学家已经在辣椒素合成有关基因克隆方面进行了研 究。韩国研究者从已知最辣的一种辣椒Habanero(Capsfoum cMnense)中筛选 到39个胎座特异的克隆，将它们分为四类：并预测Group I中的酶(酰基转移 酶和脂肪酸乙醇氧化酶)参与了辣椒素的生物合成。美国研究者Curry，AIuru 等(1999，2003)，从Habanero(Capsicum chinense)胎座分离到几个与辣椒素生 物合成有关的cDNA克隆如fas(AFD85148)、pAMT(AF085149)等，而且这些克隆 的转录是胎座特异的。 本研究利用根据Kas基因、pAMT基因的mRNA设计的两套特异性引物与16 个随机引物组合，以辣椒基因组DNA为模板对两个基因的上游序列分别进行了 TAIL—PCR扩增。在研究中，将TAIL—PCR条件进行优化，共得到14个特异条带， 条带大小大多在300--800b