分选注意事项.DOC

分选注意事项 分选前 确保液滴延迟时间准确，调节Drop delay98%，保证细胞分选纯度。 先用无菌水清洗分选仓，洗去残留的PBS，再用酒精棉无菌消毒，尤其是waste drawer和电极板。 选择合适的喷嘴，易碎的细胞尽量选用低压和大喷嘴。进行96孔板分选时，尽量采用大喷嘴。分选前确保喷嘴没有堵塞。 确保液流稳定，如果不稳定，请用无菌水冲洗，待液流稳定后再分选。 酒精或clean清洗后，用无菌水大量冲洗，洗去残留的的酒精或clean，保证分选细胞活性。 分选时 上样前用内加适量抗生素的1×PBS进行管路冲洗，用40或70um无菌滤膜进行过滤。 选择合适的进样速度，保证效率75%，70um喷嘴流速一般不超过20000cell/s，100um喷嘴一般不超过6000cell/s（按具体情况决定）。 分选时收集管里保证一定的培养液，调节时保证液滴打在液面上，防止细胞打在管壁上影响活性。15ml收集管液面高于3ml，5ml收集管液面高于1ml。 收集管中培养液抗生素浓度是正常培养液的2-3倍（按具体情况决定）。 如果分选过程中喷嘴堵塞，请进行超声清洗，安装完后重新调节Drop delay。 分选后 分选完后请整理好无菌操作台，做好登记。 分选下来的细胞请尽快换液无菌培养。 如果有任何染菌或其它的情况，请及时联系我们。 *独立分选时请严格按照分选操作步骤进行，如有问题请及时联系工作人员 *无菌分选室里不超过3人（包括工作人员） *严禁分选室里带入食物及聊天 *如果分选带有感染性病原的细胞，请及时与工作人员联系，做好防护措施 *学生分选之间保持至少半小时以上的无菌清洗时间