血液标本可用于CD4T淋巴细胞.ppt

标本的采集 标 本 的 采 集 采集用品 ?采血管 真空、负压 抗凝（EDTA或枸橼酸钠） 无菌 ?针头 蝶形针头 采集用品： ?采血套管 固定采血管位置，方便操作；保护操作者的安全 注意：切勿将采血针头的套管回套！ 注意采血后器具的放置、消毒、处理 标 本 的 采 集(续) 标本的采集(续) 采血后应立即握住试管两端，颠倒混匀多次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固。 准备适当数量的样品管 当同一样品的血球检测和流式细胞仪免疫表型检测在同一实验室内进行时，用一个装有K3EDTA的试管即可。 对所有样品编号，并写明日期和时间。 标 本 的 运 输 ?在标本运输过程中，应确保标本能够及时、准确运输到指定地点。要求提前与对方联系，确定时间，对方应提前做好相关实验的准备工作，尽快进行标本处理 ?运输的所有标本都应有送检单给接受样品的实验室。每张送检单都应详细填写所要求的内容. 样 品 的 运 输 运 送(续) 尽可能快地将样品送至免疫表型检测实验室。 如需运送样品到其它地点时，应将装样品的试管放于一个防漏的容器中，并将此容器放于一个装有吸水性物质的指罐中，以防止震动并可吸收所有试管破裂漏出的血液。盖紧指罐，用橡皮带系紧。 应选择特定的方案，并且安排合适的时间和运输样品。 样 品 的 接 收 样品到达以后立即检查试管及其所装的血样。 不可检测溶血或结冰样品。 不可检测凝血和乳糜的样品。 如果样品的采集时间已超过48H，不于接收. 标 本 的 处 理 一般采集HIV-1感染者全血10 - 20ml 血浆（含有血小板） 淋巴细胞层 红细胞层 1 ． 抗 凝 2 ． 无 菌 3 ． 室 温 4 ． 24h 内处理 实现 CD4, CD8 , CD3 绝对计数 FACSCount 结果可信度： 绝对计数 质控 内置错误自动报警 FACSCount 内置微处理器实现数据自动分析 自动打印质控与病人的检测结果 简单易用的系统控制面板 配套的样本制备工作台 样本制备方法简捷，避免细胞损失 FACSCount 试剂与对照 FACSCount 工作台 FACSCount – 完善的系统 每管加入 50ml 全血加入，混匀，室温避光孵育1h 无需溶血 1 每管加入 50ml 固定液，混匀，室温避光孵育30min 无需离心洗涤 2 FACSCount上机检测. 无需血球计数仪，直接得到绝对值结果 3 3步测定CD4, CD8 ，CD3 绝对计数 预配试剂 FACSCount – 完善的系统 FACSCount – 完善的系统 检测试剂盒组成（50人份/盒） 荧光试剂 2个组合/人份 CD4PE/CD3PE-CY5 CD8PE/CD3PE-CY5 固定液 效期 2—8 0C储存6个月 FACSCount – 完善的系统 质控试剂盒（50人份/盒） 零，低，中，高 4种靶值微球 效期 2—8 0C储存1个月 FACSCount 3步测定CD4, CD8 ，CD3 绝对计数 每管加入 50ml 全血加入，混匀，室温避光孵育1h 无需溶血 1 FACSCount FACSCount 每管加入 50ml 固定液，混匀，室温避光孵育30min 无需离心洗涤 2 FACSCount上机检测. 无需血球计数仪，直接得到绝对值结果 3 FACSCount 打印结果 对照 病人标本 FACSCount – 分析 实验资料的记录 实验应及时、准确地记录结果。 实验记录中应包括以下内容：日期、操作者、所有样品、实验内容、过程（步骤）、结果及有无事故等。 整个实验室的实验资料要统一有专人负责，按固定格式记录在案。 计算机生成的实验结果，存档备案：定期拷贝计算机结果文档，备案保存。 HIV/AIDS CD4检测时间 一经抗-HIV确证的HIV/AIDS，应立即进行CD4细胞检测。（基线） CD4细胞数200个/UL,每半年进行CD4细胞计数检测。 CD4细胞数200个/UL ，立即进入治疗。 进入治疗的AIDS,严格按照3月、6月、12月、18月、24月时间来进行采血检测。 CD4细胞检测报告时间 经CD4流式细胞仪细胞检测后，一周内将结果反馈送检单位 CD4细胞检测注意事项 3.运送样本要求，春、秋季室温（18°C－23°C），夏季冷藏，冬季保温。 4.样本量应按负压管的要求采集。 5.溶血、乳糜和凝血的样本不于接收。 6.送检表和样本不得放在同一容器内。 谢谢各位 * CD4T淋巴细胞检测标准及要求 毛爱玲 山西省性病艾滋病监测中心 HIV在人体内的复制 1.吸附及穿入：gp120+CCR5 →GP41和膜融合→核衣壳穿入宿主细胞 2.脱衣壳和逆转录：P24+亲