卵白蛋白的提取及酶解技术的研究-食品科学专业论文.docxVIP

单位代码：1 单位代码：1 0 3 3 9 研究生学号硕士学位论文 卵白蛋白的提取及酶解技术的研究 论文评阅人： 隧壁盈熬援 莶矗副教援 陵鍪湛副盟蕴虽 答辩委员会 主席： 直维逸熬援 委员： 塑塑良婴宜虽 笠丝塞蛋4熬援 隆直壹副熬攫 盐矗副熬援 答辩日期：2008年5月30日 ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY Research on the Extraction and Hydrolysis of Ovalbumin A Thesis S ubmitted for Master Degree of Engineering By Weng Dandan Supervisor：Associate Professor Chen Youliang College ofAnimal Sciences Zhej iang University Hangzhou，RR．China May，2008 课题来源：浙江省重大科技攻关项目：鸭蛋精深加工关键技术及产 课题来源： 浙江省重大科技攻关项目：鸭蛋精深加工关键技术及产 品研制(计划编号：2004C12017) r IIII__ 目录摘要 目录 摘要 ．．i Abstract ．ii 第一章 引言 1 1课题的研究背景和意义 ．1 2文献综述 ．2 2．1蛋清的特性 ．．2 2．1．1 蛋清的营养价值 2 2．1．2 蛋清中的过敏原 3 2．2蛋清水解物 ．．6 2．2．1 蛋清水解物的理化特性 6 2．2．2蛋清水解物的生物学特性 6 2．2．3 蛋清水解方法的研究进展 7 2．2．4 蛋清水解物的应用 8 2．3 卵白蛋白 9 2．3．1 卵白蛋白的基本性质 9 2．3．2卵白蛋白与serpin 10 2．3．3 卵白蛋白的氨基酸序列 ．．1 1 2．3．4 卵白蛋白的三级结构 12 2．3．5卵白蛋白的提取方法 ．15 2．3．6 卵白蛋白的开发情况 ．16 3本课题研究的主要内容 1 7 第二章材料与方法 18 1 材料 ．．1 8 1．1 原料 1 8 1-2 仪．器 ．．1 8 2实验方案 2实验方案 ．19 2．1 卵白蛋白提取工艺的研究 ．．19 2．1．1 工艺流程 ．1 9 2．1．2操作要点 ．19 2．2卵白蛋白水解工艺的研究 20 2．2．1 工艺流程 ．．20 2．2．2正交试验方案 ．20 2．2．3操作要点 ．20 2．2．4测定方法 ．2l 2．3 卵白蛋白水解物对小鼠免疫功能的影响 21 2．3．1 试验动物分组及饲养 ．21 2．3．2指标测定 22 第三章结果与分析 23 l 卵白蛋白提取工艺的研究 23 1．1饱和硫酸铵溶液与蛋清质量比对卵白蛋白得率的影响 23 1．2 pH对卵白蛋白得率的影响 24 1．3 卵白蛋白电泳鉴定结果 25 2卵白蛋白水解工艺的研究 26 2．1 卵白蛋白水解正交试验结果 26 2．2验证试验结果 27 3 卵白蛋白水解物对小鼠免疫功能的影响 27 3．1 卵白蛋白水解物对小鼠生长性能的影响 27 3．2 卵白蛋白水解物对小鼠免疫器官指数的影响 27 3．3 卵白蛋白水解物对小鼠红细胞免疫功能的影响 ．28 第四章讨论 29 1 卵白蛋白的提取 29 2卵白蛋白的水解 30 3 卵白蛋白水解物的免疫调节功能 ．j．．30 第五章结论 第五章结论 ．32 致谢 33 参考文献 ．34 浙江大学硕士学位论文摘要 浙江大学硕士学位论文 摘要 卵白蛋白是蛋清中最主要的蛋白质，其结构性质均已研究得非常清楚，但是 关于卵白蛋白的生物活性却研究甚少。本试验研究鸭蛋清卵白蛋白的提取和水解 工艺，并观察卵白蛋白水解物对小鼠免疫功能的影响。 本试验采用半饱和硫酸铵法从鸭蛋清中提取卵白蛋白，对影响提取率的两个 主要因素饱和硫酸铵与蛋清的质量比以及pH值进行优化后，确定提取工艺为： 饱和硫酸铵溶液和等质量蛋清混合盐析后离，tL,，上清用O．5M H2S04调节pH至 4．3，静置过夜，离心后去上清，将沉淀溶解，超滤脱盐，得卵白蛋白。此工艺的 卵白蛋白得率为4．32∥1009蛋清，提取率为72．73％。 卵白蛋白用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和动物蛋白水解复合酶三酶水解。通过 L。(3)4正交试验优化了中性蛋白酶与动物蛋白水解复合酶的用量和水解时间这四 个因素。确定水解工艺为：配制浓度为4％的卵白蛋白，静置过夜；水浴90℃以 上30min；溶液温度冷却至50℃，pH调至9．5，2％(E／S)的碱性蛋白酶水解3h： 溶液温度调至43℃，pH调至7．5，2％中性蛋白酶水解5h；温度升至54℃，pH 不变，加2％动物蛋白水解复合酶水解5h；升高溶液温度至80℃以上，维持20min， 钝化酶。由此工艺