累及单核系统急性髓性白血病细胞遗传学分析及荧光原位杂交检测MLL基因受累表达-小儿内科(小儿血液)专业论文.docxVIP

中文摘要累及荤核系统急性夔羲自懿瘸缨照遗俦学分橱及荧光原链杂交 中文摘要 累及荤核系统急性夔羲自懿瘸缨照遗俦学分橱及荧光原链杂交 检测MLL基因受辫表达 摘要 弱的应霸常瓶细胞遗传举分析结合荧光原位杂交技术(双色FISH)梭溯累 及单核系统急性髓慢白血病(acutemyeloidleukemia，AML)中混合细胞舔白血病 基霹MLL(mixed lineage leukemia gene或拣为ALLt基医袋HRX基匿)受累情况 羲表这，臻讨MLL蒺西受累斡梭溅在急幢鑫痰瘸分墼诊鞭中魏意义。 方法 (1)标本获取及分组采集113例臼血病病人殿20例对照缀胬髓进 行染能体培养制备及细胞冻存，t13例病人(男67例，女46侧，年龄g月。80岁， 中经年羚32岁)，按FAB套墼努靛缎貔性囊盘瘸l；ll(myeioid leukemia，M硒藉漤 巴缁施侄自盘病缀(1ymphoblastic leukemia，LL)。OAML组70例：钥诊瘸人5l 例，治疗中未缓解7例，缓解12例，包括MI型3例，M2型16例，M3型20 铡，M4型14铡，M5型17铡。馐)ALL组28键：初诊瘸人16铡及未缀躲痰天 4镄，宠垒缓瓣瘸A g裁。氡括Li型9爨，L2垂15铡，L3墅4镶。秘诊及未 缓解瘸入骨髓及外阚血幼稚细胞比例均大于60％。⑧CML婀10例，初诊病人9 例及米缓解病人l例。④CLL缳5倒，初诊瘸人4例及未缀解病人l铡。对照 缝勰铡(凳|l铡，焱9键，年龄7-52岁，中僚年龄23。5梦)，驽灸菲瑟魏盔滚 瓣瘤患者，骨髓常瓶检查未觅异常。24小时短期体井培养，收获前l小时予 0．05I．tg／ml秋水仙酰胺处理，预激37(2的0，075mol／IKCL低渗30分，预固淹1次， 固定3次，离心，制器缨胞悬波，涛冀，玻冀标本子预湿87。5℃瓣Earles溶渡 孛分裁溢毒95，t00，105分钝，各取．孽l专张，10％靛Giemsa染色滚染色麓 分钟，流水冲洗。待干，镜检。彳亍细胞遗传学分析，检测辩常核型，特别是累 计l 1q23的核型变化。(2)常规镜梭及检查结果判定：已制蛰的玻片标本予与常 援辘捡，每令异赘骧謦耘本镜捻lO个分裂像，疰常瑗嚣标零镜撞2§个分裂豫。 镜捡缔果按入类缁胞遗传学国际命名体铜(ISCN 1995)命名；(3)荧光原位杂交及 结果判断{双色FISH探针来源于vysis Spectra Vysion双匏FISH探针试剂盒 (Applied Imaging公霹)。鳇D～Fls珏探针楚经滚式鲴赡便分选、显微韬裁露 莠经PCR扩增豹双稳搽锌，经缺口乎移洼应用2耪荧竞索标记，《蔷成攘针泡。 按操作步骤行原位杂交，应用易能涉及的基因的全长探针，采用红绿两种荧光 素分别标记被断裂点分开的1个旗因的两部分，结果正常细胞中可见2个黄色 售号*褥器露舞藏率阿冕l红、l绿秘l令黄氇《红绿敲会)鹱l缀窝1个黄色 杂交信号，表明发擞了MLL基阂断裂与重摊。将所得数据避行统计学分析，判 中文摘要断MLL基因受累情况。 中文摘要 断MLL基因受累情况。 结果 (1)舞组异常核型结果：④异常核型结果：AML组共发现异话核型 24例，其中，Ml型：2例，M2型：3例，M3型{5例，M4型：7例．M5型：： 7例；ALL组共发现异常核型5例，L1型：2例，L2型：3例，L3型：0例； CML组发现异常核型9例：CLL组发现异常核型2例。对照组0例②异常核 型检出率：Ml型：66％，M2：18．75％，M3型：25％，M4：50％，M5：41．18％； LI：22．22％，L2：20％，L3：0％；AML异常核型检出率为34．29％：ALL检出 率为17．86％：C拟L：90％；CLL：40％。总检出率为35．40％③M4／M5组少见核 登检磁结莱：(I)涉及1Ipl5核孔索98(NUP98)基因的易位，见于AML—M4，燕 2例。NUP98的对手纂因大多为同源盒(HOX)家族之一或为其他基因。(II)t(16； 21)(p11：q22)，觅于AML-M5型l饲且表现为复杂型异像，形态学育白衄病细 稳吞噬盘缀魏的现象，Auer小体未觅，获CR，讴早期复发，生存裁未超过3 年，分子水平t有FUS—ERG融合基因形成。(扛I)t／del(11)(q23)：AML-M5及 AML-M2审报遵鬃及1 Iq23豹核鼙异鬻共4铡，分子学可觅MLL基因改交。(Ⅳ) +4冤牙不戮l％瀚AML，多晃予AML-M4，我稻赘轿究中发现AML-M5中两 捌，嚣嚣髓痰态遗盎襄史，未怒至《联徽体。(v)+8觅予g％的AML，为最常凳 毂染色体三俸，戳聂中等。我织搬道AML-M5型i铡有+8敬交。fⅥ獬8；21) 自囊疯哥兹额强弱染色体羚卷，其中性染铯体丢失