蜡梅属植物花粉低温及超低温保存研究-园林植物与观赏园艺专业论文.docxVIP

摘 摘 要 蜡梅属植物具有很高的观赏价值，是重要的园林绿化植物之一。本研究以蜡梅 属植物花粉为材料，进行了花粉低温及超低温保存技术、保存后活力测定，以及超 低温保存前后生理生化指标变化三个方面的研究。通过实验，初步确立了蜡梅花粉 超低温保存的技术程序。主要研究结果如下： 1．蜡梅花粉的超低温保存程序为：花粉在25C下恒温干燥24小时后，不经过 预冻处理直接投入液氮，保存一定时间(1-360d)后取出花粉，用37C水浴快速化 冻。 2．蜡梅花粉萌发培养基为15％蔗糖+50mg：L H3803+0．7％琼脂+1．5mg／L 2，4．D+0．05％Ca2+，调整各成分浓度，对花粉萌发会产生影响。所测的Hll、H29、 H46、I-IS0四个基因型蜡梅花粉在上述培养基成分浓度组合中萌发率最高。 3．贮藏温度是影响蜡梅花粉寿命的重要因素。经研究发现，室温和4C适合花 粉的短期保存(10．15d)，例如H8、Hll、H89号花粉：在．20℃、．70℃、．196℃的 保存下，花粉的寿命延长。I-IS、H29、H50号花粉在液氮中保存1年时，萌发率均 比保存前分别高出21．02796、23．136％、1．623％。研究表明，超低温贮藏是解决大部分 基因型蜡梅花粉长期保存的有效途径，如I-IS、H29、H50、H82、H86。 4．花粉活力随干燥时间延长而增加，在24h达到相比较好的萌发率，干燥时 间为36h，花粉萌发率开始出现下降。通过测定“个基因型蜡梅的花粉在25℃下分 别干燥4h、8h、12h、16h、24h、36h等六个水平的萌发率，确定24h为蜡梅花粉的 合适干燥时间。 5．预冻温度和化冻方式影响蜡梅花粉超低温保存效果。不经预冻处理直接将 花粉投入液氮保存，取出后用37℃水浴快速化冻效果较好。 6．作为保护性酶，SOD、CAT、POD的活性在蜡梅花粉超低温保存过程中发 生不同程度的变化，．196℃超低温胁迫提高了酶活性；而逆境生理指标MDA的含 量在蜡梅花粉超低温贮藏后增加，说明花粉膜脂过氧化程度加强，膜系统受损；超 低温也影响蜡梅花粉的物质代谢，使花粉中的蛋白质含量呈现波动变化。 关键词；蜡梅属；花粉；低温保存：超低温保存；活力鉴定；生理生化指标 Plants Plants of Chimonanthus are used as important landscape materials with high ornamental value．Procedure of pollen cold storage and eryopreservation，pollen viability after storage，physiological and physiochemical indexes’changes before and after cryopreservation WelTe studied here．By mealz$of plentiful experiments，cryopreservation procedure was established primarily．The results showed： 1．The procedure of pollen cryopreservation was stated as following．After drying for 24h at the stationary temperature of 25℃，pollen could be plunged into 13q2 without being·frozen．Then water at 37(2 WaS used for pollen thowing． 2．The basic pollen germination medium of Chimonanthus Was 15％sucrose+7％ agar+1．5mg／L 2．4-D+50mg／L H3803+0．05％Ca“．Adjusting the concentration of indigrents in the medium had effect on pollen germination．But pollen germination rates of Hll、H29 H46、H50were highest 011．the medium when the combination of ingredients was arranged as stated above． 3．The storage temperature was all important factor affecting the pollen life span． Room temperat