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阪崎肠杆菌检验 庞杏林 广州市疾病预防控制中心 Guangzhou Center for Diseases Prevention and Control 简 介 阪崎肠杆菌( Enterobacter sakazakii ) 分类在肠杆菌科，肠杆菌属， G-b，无芽胞，有周身鞭毛，兼性厌氧，棒状或球杆状，长 0.6~6.0μm，宽 0.3~1.0 μm。 生长特性：经过适宜的条件培养后在营养琼脂或血平板上形成圆形，光滑，突起，直径 2~3 mm，黄色菌落，黄色素在 25 ℃ 时更为明显。 生化特性与阴沟肠杆菌相似，故1980年以前被称为黄色阴沟肠杆菌，后更名为阪崎肠杆菌。 简 介 自然界分布广泛，在水、土壤、食物、排泄物等中都能够检出。细菌不耐热，加热到72℃持续15秒就可以杀灭。细菌不在人与人之间传播。 常见于生产婴儿配方奶粉的设施和家居环境中。 奶粉？隐形杀手？ 简 介 危害性：阪崎肠杆菌已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌 简 介 阪崎肠杆菌属条件致病菌，在一般情况下，不对人体健康产生危害,成年人感染常为轻度的胃肠道症状。 新生儿(出生28天或以下)和不足2个月的婴儿，尤其是早产儿、体重不足2.5公斤和免疫力较弱（母亲HIV）的婴儿的感染风险最高。可致严重脑膜炎，败血症，小肠结肠炎，死亡率可高达50%～80%。  新生儿(尤其是早产婴儿)胃的酸性较成年人低（PH高），这可能是阪崎肠杆菌可在婴儿体内生存的一个主要因素。 简 介 1961年，英国的Franklin等人首次报道了2例阪崎肠杆菌脑膜炎，此后相继出现阪崎肠杆菌致人类感染的散发和暴发的病例报告。 统计到2004年，全球各地报道的确诊病例在60例以上，导致多起商业婴儿配方奶粉被广泛召回。 简 介 微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。 以下3 种主要途径可以导致婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染: A 通过生产婴儿配方奶粉的原料; B 在巴斯德杀菌后,配方粉污染或其他添加 剂干粉带入; C 喂养婴儿前被污染 简 介 2002年美国FDA在本土某些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌。 2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉。 阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点，得到世界多国相关部门的重视。 简 介 2005年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪崎肠杆菌。 2008年10月17日，产自台湾的9.62吨配方奶粉从香港入境时被检验出阪崎肠杆菌超标 。不合格奶粉包括味全婴儿配方奶粉、味全幼儿成长配方奶粉和味全较大婴儿配方奶粉。 简 介 阪崎肠杆菌的检验方法？标准化？ 简 介 美国食品和药品管理局(FDA)的检测方法是国际检测阪崎肠杆菌的标准生化方法。此外，还有依据该菌生理生化特征的鉴定方法和PCR法检测及荧光PCR等分子检测方法。 2008年11月国家标准出台前，我国只有行业标准。 简 介 2005-5-20中国检验检疫科学研究院和天津出入境检验检疫局牵头完成《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准。 该标准建立了阪崎肠杆菌改进的传统检测方法(经典方法)、普通PCR方法和荧光PCR方法(快速筛选方法)，其中改进的传统方法与FDA方法比较，检测结果一致，但效率大大提高，时间缩短1/3～1/2。  简 介 2006年2月，国际标准化组织(ISO)和国际乳品联盟(IDF)联合公布了“乳和乳制品中阪崎肠杆菌的检测”方法，即ISO/TS 22964 IDF/RM210 简 介 2008-11-21，中华人民共和国卫生部联合国家标准化委员会发布GB/T 4789.40-2008食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验， 2009-03-01实施。 这项标准的出台，解决了我国检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无国家标准检测方法的问题。 适 用 范 围 规定了食品中阪崎肠杆菌的检验方法 适用于婴幼儿配方食品，乳及乳制品，及其原料中阪崎肠杆菌的检验 设备和材料 微生物实验室常规灭菌与培养设备 冰箱2℃~5℃、水浴箱44 ℃ +0.5 ℃ 、感量0.1g天平、振荡器、均质器 无菌吸管10ml，0.1ml，微量移液器，吸头 设备和材料 无菌锥形瓶100ml\200ml\2000ml 90mm直径无菌培养皿 PH计或精密PH试纸 VITEK全自动微生物鉴定系统（可选用其他等效设备代替) 培养基和试剂 缓冲蛋白胨水BPW（略） 改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素mLST-Vm