沙眼衣原体E血清型的小鼠生殖道感染模型研究-皮肤病与性病学专业论文.docxVIP

英文缩略语表Abbreviation 英文缩略语表 Abbreviation C．t(chlamydia trachomatis) 沙眼衣原体 STD(sexually transmitted diseases) 性传播疾病 NGU(non-gonococeal urethritis) 非淋球菌性尿道炎 EB(elementary body) 原体 IFU(inclusion forming unit) 包涵体形成单位 PCR(Polymerase chain reaction) 聚合酶链式反应 ELISA(enzyme linked immunosorbent assay) 酶联免疫吸附测定 BSA(bovine serum a]bumin) 牛血清白蛋白 DEAE—D(diethylaminoethyl dextran) 二乙氨乙基葡聚糖 min(minute) 分钟 mL(miIiiliter) 毫升 p p L(microliter) 微升 rpm(revolutions per minute) 转／分 bp(base pair) 碱基对 MoPn(mouse pneumonitis) 鼠肺炎 MOMP(major outer membrane protein) 主要外膜蛋白 HIV(human immunodeficiency virus) 人体免疫缺损病毒，艾滋病病毒 lffHC(major histocompability complex) 主要组织相容性复合物 硕士研究生论文 硕士研究生论文 中文摘要 沙眼衣原体E血清型的小月：生殖道感染模裂研究 摘要 非淋菌性尿道炎(NGU)是目前最常见的性传播疾病，而其中30％～40％ 是由C，t感染所致。C．t的流行在国内外均产生了相当重的社会负担， C．t 生殖道感染同时还增加了HIV感染的危险性。但是至今为止，C．t导致泌尿 生殖道感染的致病机制仍然没有完全弄清楚，尤其是局部感染导致的系统性 疾病。建立C．t的小鼠生殖道感染动物模型对更深一步了解C．t感染的致病 机制、免疫、免疫病理、疾病进展过程以及对该病原体所致NGU的药物治疗 疗效及毒性观察，疫苗研制和疫苗免疫效果评定等各方面均有一定的帮助价 值。C．t疫苗的研制是C．t防治史上非常重要的一页，而建立在动物模型基 础上的疫苗免疫效果评定是疫苗研制进程中必不可缺的一步。 目的：通过阴道接种途径建立C．t E血清型的小鼠生殖道感染模型，同 时监测小鼠阴道清除C．t E血清型时间，并在有限时间内初步了解小鼠单次 C．t E血清型生殖道感染后抗C．t IgG抗体的变化规律，为C．t疫苗的研制 奠定扎实的动物试验基础。 方法：在细胞培养的基础上通过多种方法提高C．t培养的感染率，成功 培养c．t E型株，然后用高速离心提纯c．t EB并定量(以IFU／TIlL表示)，同 时用考马斯亮蓝法进行C．t EB蛋白定量。选择6—7周性成熟BALB／c雌性小 鼠，通过阴道接种C．t感染小鼠，接种前lOd、3d股部肌肉注射黄体酮以增 加小鼠对C．t感染的敏感性。感染后相应时间通过阴道一宫颈口拭子PCR、衣 原体单克隆抗体免疫荧光、C．t分离培养以及ELISA方法检测血液中抗C．t IgG抗体来证实感染的存在。实验通过C．t分离培养观察小鼠阴道清除C．t E 血清型时间，并通过自行摸索ELISA实验条件来检测、观察感染后不同时间 点小鼠血清中抗C．t IgG抗体滴度及其变化。 堡主旦塞生堕壅 堡主旦塞生堕壅 生墨垫矍 结果：1、C．t E型株成功培养并定量，结果显示，所有的孔板90％以上 细胞感染，收集6个6孔板的C．t悬液，高速离心后得到的ImLC．t EB悬液 其浓度为5．8952X i08IFU／mL，考马斯亮蓝法进行C．t EB蛋白定量显示蛋白 浓度为37399／mL。2、小鼠C．t生殖道感染模型成功建立。四种实验方法均 证实感染的存在。利用c．t质粒引