蓝莓成花机理初步研究-森林培育专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独 创 性 声 明 本人声明，所呈交的学位论文，在指导教师指导下，通过我的努力取得的成果，并且是自 己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外，论文中不包含其他 人发表或撰写过的研究成果，也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用 过的材料。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如 被查有严重侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 论文使用授权的说明 本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权送交论文的复印 件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其 他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。□ 不保密, 本学位论文属于不保密。 □√ （请在方框内打“√”） 学位论文作者亲笔签名： 日 期： 指导教师亲笔签名： 日 期： 万方数据 万方数据 摘要 摘要 蓝莓（Vaccinium ssp.）为杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium）植物，作 为一种新兴果树，具有增强视力、抗癌、抗衰老、预防老年痴呆和心脑血管疾病等强 大的保健功能，是近年许多国家发展十分迅速的优良果树之一，尤其是欧美国家。英 国权威营养学家将蓝莓列为 15 种健康食品之首，联合国粮农组织也将蓝莓列为人类 五大健康食品之一。成花是植物发育过程中的重要时期，是植物生活史中从营养生长 向生殖生长转变的重要转折点。蓝莓是最容易形成花芽的树种，成花直接决定了当年 的产量，因此无论从成花理论还是为解决实际问题都有必要研究蓝莓的成花问题。本 文利用石蜡制片技术，研究蓝莓花发育的形态发生；利用酶联免疫吸附测定技术 （ELISA），探讨蓝莓成花过程的激素含量变化；利用 PCR 法从蓝莓中同源克隆成 花重要基因 StLFY；利用定量 RT-PCR 技术；分析蓝莓成花重要基因 StLFY 的时空表 达变化，从形态解剖学、生理学和分子生物学角度探讨蓝莓的成花机理，主要结果如 下： （1）‘奥尼尔’的花期从 3 月 1 日开始至 4 月 2 日结束，历时 32 天；‘梯芙蓝’ 的花期从 3 月 15 日开始至 4 月 18 日结束，历时 34 天；‘园蓝’的花期从 3 月 20 日开始至 4 月 18 日结束，历时 29 天。 （2）蓝莓花芽形态分化共分 6 个阶段，分别是开始分化期、花序原基分化期、 萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期和心皮原基分化期。其中，心皮 分化期又可分为心皮分化前期、心皮分化中期和心皮分化后期。其中，‘奥尼尔’花 芽的形态分化从 8 月 24 日开始，至 10 月 18 日完成，历时 54 天；‘梯芙蓝’花芽的 形态分化从 9 月 9 日开始，至 10 月 23 日完成，历时 44 天；‘园蓝’花芽的形态分 化从 9 月 9 日开始，至 10 月 18 日完成，历时 39 天。 （3）蓝莓花芽生理分化期以及休眠期需要玉米素核苷（ZR）含量保持在较高水 平，而低水平的ZR对蓝莓花器官形成以及花芽萌发具有促进作用；低水平的赤霉素 （GA）对蓝莓花芽生理分化，形态分化期到休眠期的转变，花芽萌发均具有促进作 用，而高水平的GA对花器官形成的中后期以及休眠期花序轴的形成具有促进作用； 高水平的生长素（IAA）在蓝莓花芽生理分化期，花器官形成中后期，并对休眠期花 序轴的形成和花芽萌发都具有一定的促进作用，而低水平的IAA在花芽形态开始分化 期、花器官形成前期和形态分化到休眠的转变时期起到一定的促进作用；低水平的脱 I 蓝莓成花机理初步研究 落酸（ABA）对蓝莓花芽萌发具有促进作用，且ABA含量低的品种更容易成花。 （4）根据已知杜鹃花科植物的 LFY 基因保守区设计特异引物和简并引物，通过 PCR 扩增克隆到 1 个 LFY 基因片段，长度为 1141bp。根据获得的 LFY 基因片段设计 引物，并利用 3’ RACE 技术扩增得到了 StLFY 基因的 3‘端序列，长度为 827bp，末端 具有 poly A 尾巴的结构。二者拼接结果为 1660bp。 （5）蓝莓 StLFY 基因在蓝莓不同部位的表达量有差异，在花芽中表达最高，其 次是叶，而在茎、根以及花朵中略有表达，且在根和花朵中的表达量极低；‘奥尼尔’、 ‘梯芙蓝’和‘园蓝’的花芽形成时期可能有所不同，分别在 7 月 24 日、7 月 14 日 和 8 月 24 日；StLFY 基因对蓝莓花器官形成期，尤其对其中后期具有促进作用，且 低水平 StLFY 基因表达量有利于蓝莓花芽向休眠期的转变；另外，StLFY 基因对蓝莓 的花芽萌发起促进作用。 关键词：蓝莓，StLFY，内源