山羊Hr基因和RORα基因的克隆及序列分析-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 3 8号染色体。 Hr基因具有高度保守性 ，在Genbank 中已经公布的小鼠、大鼠、野猪、 绵羊、 \猴、人的Hr基因都具有高度的相似性 。 1. 2. 2 Hr 基 因的研究进展 1924年，人们首次发现了Hr基因 ，它是在伦敦的一家饲养场中无毛 小鼠(Hairiess mice ) 身上偶然发现。这利小鼠出生时被毛正常 ，2周左右开始脱毛 ，最终处于无毛 状态，直至死亡 。经过研究 ，人们发现造成这种状况的原因是小鼠的某段基因发生突 变，导致隐性基因表达 ，因此根据?产生的无毛性状 ，便将此段基因命名为Hr基因 (Hairless gene ，Hr) ，之后就开始了人们对此基因研究的漫长之路。 1994年 ，在hairless gene被发现70年后， Cachon-Gonza lez等同i联合运用PCRì9liJ 序及外显子捕获等技术 ，确 定了小鼠h airless gene的cDNA序列(基因登录号 Z32675) ，它全长4017 坤，包含 19个外 显子、18个内含子，预计可编码有 1182个氨基酸 的蛋白质，被定位于小鼠的14号染色 体上[181 ，它包含一个长的开放阅读框，该框架起始于第二外显子，终止于多聚腺甘酸 化位点前的第 93个核甘酸 ，第二外显子 内的AUG 出现在脊椎动物转录起始位点 的一 致序列内，没有显示前导序列的疏7.)(区和 l跨膜区 ，若将Hr基因转入轩状病毒表达载体 中，则可产生一个分子量约为 127kD的蛋白质，分别位于595、598、617和620位的四 个 半脱氨酸可形成一 个潜 在 DNA 结合钵指结构域，其结构为 : cys-Xaa2 -cys-Xaa2 -cys-Xaa2 -cysI11) ，考虑到其他悴指蛋白的功能性作用 ，Hr基囚 的钧: 指结构域可能在核甘酸结合和 l或蛋白质与蛋白质间的相互作用方面起 一定作用l飞 大 鼠的Hr基因是在研究大鼠脑组织中的甲 状腺激素反应基因时确定 的， 它和小鼠Hr基因 有94%的氨基酸相似性 :人的HI基因是在用放 射性杂交困 曾将人的Hr基因定位于 8p12 后克隆出来的 ，与小鼠 14号染色体有同线性 ，是连锁丘吉妻性脱发 的候选区域，编码 1189 个氨基酸 ，与小 鼠、大鼠分别有84%和83% 的相似性[39l ，这一事实充分表明 Hr基因在 不同种属的哺乳动物中有高度的保守性，而且正常的Hr基因产物可能参与一些基本的 调节途径I划。 哺乳动物的同基因在维护毛发生长中起着重要的作用。 Hr基因编码一个潜在的 钵指结构转录因子 例 ，调控出生后第一次毛发生长周期 的转换 ，对毛囊细胞增殖、分 化和1调亡的平衡及保持毛乳头和上皮 的完整性具有重要作用 Inl o 无毛蛋白主要表达于 毛挺 、表皮和脑123) 。但其确切功能还不太清楚，体外实验表明无毛蛋白作为 一个 甲状 腺激素受体的转录辅阻遏物，对甲状腺激素调控的下游基因起到负调控作用 l2410 人和 小鼠Hr基因的突变可导致全部或部分毛发的丧失 (2飞 Hr基因的敲除 ，可导致皮肤脱毛 并出现严重的皱榈 恒的 ，这进一步证明 ，Hr基因参与毛发的正常代谢。但是 由基因究竟 表达于皮肤的何 处却是颇有争议的 。Cachon-Gonza lez MB和Fenner S用放射性标记的 Hr基因特异性核酸探针做原位杂交 ，不仅证实皮肤中有Hr基囚的表达 ，而且还证明 : 在皮肤中Hr基因的mR NA转录特异性地表达于2个明确的部位，即表皮和1毛囊的一些 尚不明确的区域 ，而真皮中则无表达例。但真皮中没有Hr基囚的 mRNA 转录这一结果 去rJ与早先 Billingham Sil提出的观点大相径庭，他们认为 hr/hr突变鼠的主要边传缺陷 在于其皮不能向上面的表皮提呈诱导信号。在他们的研究中源于突变的 hr/hr J 鼠的表 皮与源于有毛鼠 (+1+)的真皮重组融合后可产生正常的被毛，但是源于正常幼鼠的 表皮与源于阳仙r幼鼠的真皮 重组融合后 ，约于2用左右开始脱毛(这与 hr/hr 鼠的脱毛 时间非常相似)，鉴于此，他们认为国基因表达于其皮而非表皮I划。 1990年，我国首次发现 Hr基因。郑州大学实验动物中心在昆明 小鼠繁育过程中 发现的突变鼠。这种突变鼠脱毛从小鼠 2-3周龄开始 ，从嘴角、眼角，向腹部、头部 延伸，两周内体毛全部脱光，成为全身裸露的无毛小鼠，其脱毛性状、生长繁殖过程 都酷似国外发现的无毛小鼠，该小鼠随后被命名为豫医无毛小鼠 。之后，以此种突变 鼠为研究对象，经测交 、回交等边传试验 ，井对;fJ;进行进一步观察 和研究，发现该品 种无毛小鼠的脱毛性状可以边传，而且，其性状的分离