实验三外周血单个核细胞分离-附件.pptVIP

实验三 外周血单个核细胞分离 实验目的 掌握外周血单个核细胞分离的原理与操作 掌握外周血单个核细胞的概念 实验原理 人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）包括淋巴细胞和单核细胞。 单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其他细胞不同。因此利用一种介于1.075-1.090之间的聚蔗糖-泛影葡胺（ficoll-hypaque）分离液作密度梯度离心，离心后不同比重的血细胞在分离液中呈梯度分布,从而分离出PBMC。 实验步骤 1.用抗凝管抽取外周血2ml； 2.将装有2ml分离液的试管微微倾斜，用吸管将抽取的抗凝外周血缓缓加入到分离液上层，保持液面分层清晰； 3.水平离心机中离心，2000rpm，20min； 4.将离心好的试管轻轻拿出，用毛细吸管吸取PBMC层细胞涂片； 5.将涂片进行瑞氏染色。 * * * * 人血液中各种细胞的密度如下： 红细胞：1.093 白细胞：1.092 淋巴细胞和单核细胞：1.075-1.090 血小板：1.030-1.035 F/H= 1.077±0.001