免疫原和抗血清的制备.pptxVIP

免疫原和抗血清的制备 ;第一节免疫原的制备;二、可溶性抗原的制备：;2.细胞抗原的制备：; 蛋白质抗原的制备和纯化：;2.选择性沉淀法：;3.凝胶过滤和离子交换层析：;4.亲和层析：;　2）配体的选择：　3）抗原或抗体与支持物的结合：　　　步骤：　（1）活化支持物上的功能基因　　　溴化氛PH11　与支持物上的羟基形成氨基形成氨基甲酸酯基因　（2）交联（联接）　（3）清洗：除去未结合的pro　（4）亲和层析条件的选择： 原理：一定条件下，Ag和Ab能可逆性地结合成复合物，当条件改变（如稀酸、稀碱、浓盐、加温等）时又可将抗原抗体解离。如果将抗原或抗体固定在不溶性的载体上能从液相中专一性分出抗体或抗原。 根据这一原理，将可溶性抗原（或抗体）用化学方法偶联到不溶性载体上，当将相应的抗血清（或抗原）按层析方法加入柱中，抗血清中的相应的抗体与抗原特异性结合。其他蛋白成分随洗脱液流出。再改变缓冲液的PH值和离子强度，则可以使抗体和偶联在载体上的Ag解离（加入解脱剂），经洗脱，从而得到纯化的Ab。 ;2）配体的选择：;以免疫亲和层析为例（三）免疫球蛋白片段的制备：;（四）纯化抗原的鉴定：; 三、半抗原免疫原的制备;四.佐剂：;常用的佐剂和制备方法：; 抗体的制备;第二节　抗血清的制备;二、免疫前准备;二、免疫剂量、时间和途径选择原则：;免疫程序：;试血;三.动物采血法