毕赤酵母表达的嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶N-糖基化修饰的-微生物学报.PDFVIP

微生物学报 A cta Microbiologica Sinica 2019, 59(1): 37–47 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Research Article 研究报告 毕赤酵母表达的嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶N-糖基化修饰的作用 与功能 * 李新新，柏映国，华晨，马锐，石鹏君 ，罗会颖，姚斌 中国农业科学院饲料研究所，北京 100081 摘要：【目的】研究N-糖基化对来源于嗜热蓝状菌 β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase ，Bgl3A) 的酶学性质影响。 【方法】采用定点突变技术构建了3 个去 N-糖基化的突变体 T44A 、S228A、S299A ，并分别在毕赤酵 母 GS115 中表达纯化。【结果】与野生型Bgl3A 相比，突变体 S228A 分泌蛋白产量极低，仅能微量检 测到 p NPG 活性；突变体 T44A 和 S299A 的最适 pH 和最适温度没有改变，分别为 4.0 和 75 °C ，但二 者的 Tm 值和 70