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土壤固氮作用在中国盐沼的互花米草入侵和施氮的响应 摘要：生物固氮（BNF）是氮（N）输入到生态系统的主要自然过程。要了解植物入侵和N富集如何影响BNF，我们比较了土壤固氮率和互花米草群落以及长江口的本地芦苇群落微生物固氮率（NFM）。我们的研究结果表明，】对于氮富集的植物入侵对BNF了较大的影响。在同一个氮水平，互花米草群落有较高的土壤固氮率，但nifH基因与本地群落相比多样性较低。互花米草群落氮增加后具有最高的土壤固氮率和nifH基因丰度。我们的研究结果表明，互花米草入侵可以提高河口生态系统土壤固氮能力，因此可能进一步调节土壤氮可用性。 0 引言 生物固氮（BNF）是氮循环的重要组成部分。总陆地固氮率约为58 Tg N yr?1[1] ，占新增氮投入到生态系统[2,3]的97％以上。生物固氮率在生态系统中变化的[4]。许多生物和非生物因素如固氮微生物（NFM）多样性、土壤碳氮比、土壤磷水平可以影响生物固氮[5,6]。最近，一些研究发现，植物入侵和N富集能显着影响BNF。例如，紫茎泽兰入侵显著增加固氮细菌在森林生态系统[7]的多样性和丰富。入侵种法雅杨梅的固定施氮量每年每公顷18千克远远高于本土植物的每年每公顷0.4千克[8]。此外，N富集改变了固氮细菌群落和固氮基因的丰度[9.10]。这些研究表明，植物入侵和N富集可以影响BNF，其联合作用仍不清楚。 外来植物入侵是本地生态系统的主要威胁。入侵植物可以破坏原生栖息地，取代原生植物，改变养分循环和土壤属性[11,12]。1979年互花米草引种到我国东部沿海[13]. 在90年代中期互花米草在崇明岛首次出现后，它已经取代了原生芦苇和海三棱藨草并成为优势种[11]。互花米草入侵改变了土壤微生物群落[14,15]，改变了温室气体通量[16]。互花米草入侵也增加土壤碳和氮库大小[17]。我们以前的研究表明的互花米草的增加，而芦苇的减少，他们的凋零物在空气和土壤的分解的增加了氮的浓度[18]。 此外，长江口由于人类活动长期遭受高氮负荷。据估计，在2007年约1.339×106 吨溶解无机氮排到长江河口[19]。富集在长江的氮已经从为1990年的13.6 Tg增加到2000年的19.8 TG，其中认为氮排放的比例中已从1980年的48％增加到2000年的68％[20] 。在2020年和2050年之间DIN浓度预测是2.2-3.0mg/L [19]。氮富集之间可能导致长江口植物成分的改变[21], 以及促进生物入侵[22,23]和改变C/N循环[24,25]和微生物的活动[26]，例如，氮富集刺激CH4排放在互花米草群落但不影响原生植物群落的排放[27]。另外，氮富集能够刺激N2O在互花米草和原生芦苇群落的排放[28]。 图1长江口崇明岛研究区示意图（31°25′–31°38′N，121°50′–122°05′E）。（这个图是利用ArcGIS 10.2产生（ESRI公司，雷德兰，CA，USA）。UPC：未施肥的芦苇群落；南：未施肥的互花米草群落；FPC：施肥芦苇群落；FSC：施肥互花米草群落）。 在这里，我们进行了长江口的实验研究。由于土壤NFM和植物C输入之间的正相关关系，我们推测互花米草相对于本地芦苇对土壤固氮具有较高的模拟效果[29]。以往的研究表明是氮的富集可以影响土壤固氮[2]。因此，我们进一步推测，氮富集可以调节植物入侵后土壤的固氮作用。 1资料与方法 实验设计 研究区为东滩国家级自然保护区，位于中国长江口（31°25′–31°38′N，121°50′–122°05′E）（图?1）。海拔2-6 m，并接收从潮汐中带来泥沙和养分[30]。该地区属于亚热带季风气候，雨季在五月到九月。生长季节开始于四月，结束于10月31日。我们建立了4个小区，每个区域大约间隔500米（图?1）。所有地块在同一海拔相似的沉积物纹理，并获得相同的潮汐时间。每个小区由两个植物群落和两个氮水平（UPC：未施肥的芦苇群落；南：未施肥的互花米草群落；FPC：施肥的芦苇群落；FSC：施肥互花米草群落）组合。在这项研究中，所有的植物群落自然增长。每个小区的面积为0.8米＊0.8米，同一类型的植物群落约2米。不同植物群落间的距离不超过10米。模拟氮富集，在2012和2013的生长季节（四月至8月）增加尿素（100克N M?2 Y?1）。为了消除可能的凋落物的影响，在这项研究的开始凋落物就被彻底清除， 在实验结束时，地上生物量被收获，用烘箱干燥和称重。五个土样用一个直径为5厘米的螺旋从各个实验区区15厘米深的土壤。所采集的根际土壤在土壤剖面中的密根部分。被充分混合后，土壤样品的筛除残根和石块后分为两个部分。一部分存储在?80°C对分析固氮微生物，而另一部分被储存在4°C测定固氮速率与土壤性质。 固氮率和土壤特性的测量