桑白皮指纹图谱及血清药物化学初步研究-药物化学专业论文.docxVIP

成都中医药大学 成都中医药大学 2011 级硕士学位论文 万方数据 万方数据 摘要 中药桑白皮为桑科植物桑 Morus alba L.的干燥根皮。性甘，微苦、寒，归 肺经，具有泻肺平喘，利水消肿之功效。临床用于肺热咳嗽，水肿胀满尿少， 面部皮肤水肿。目前桑白皮的研究集中在化学成分、药理作用方面，而对桑白 皮药材指纹图谱研究较少，为了更好地建立和完善桑白皮药材质量标准，本课 题通过 HPLC 指纹图谱方法的研究，以达到桑白皮药材的定性鉴别和质量控制 的目的。通过桑白皮药材血清药物化学的初步研究，揭示桑白皮的药效物质基 础，采用 LC-MS 法鉴定入血成分，从而寻找和确定定量指标性成分，更加科学 地控制药材质量，为桑白皮的合理应用、新药研发及临床用药提供科学依据。 具体内容分为以下三个部分： 1.建立桑白皮药材 HPLC 指纹图谱：本研究通过实验筛选，确定了供试品 溶液的制备方法与样品的 HPLC 指纹图谱色谱条件，用两种不同的方法进行了 精密度、重复性和稳定性的验证试验，结果其 RSD 均小于 3.0%，测定 14 批样 品的指纹图谱，确定了 23 个共有峰，相似度高，所得高效液相色谱图特征性与 专属性强。用超高效液相色谱-二极管阵列-质谱联用仪（UPLC-DAD-MS）对桑 白皮药材特征峰进行定性鉴别，根据保留时间、紫外吸收曲线和正离子模式下 的质荷比，经与标准品或参考文献比对，初步鉴定出 3 个化合物，分别为桑皮 苷 A（1 号峰）、桑白皮素 C（14 号峰）和桑根皮素（20 号峰)，表明此方法可 用于桑白皮药材的质量控制。 2.入血成分的分析：本研究采用连续给药三天，每天两次的给药方式，在 末次给药 60min 后取血，采用甲醇沉淀血清中蛋白的处理方法，血清中各峰数 量及峰面积达到最大，经 LC-MS 鉴定出入血成分主要为桑皮苷 A，桑皮苷 A 据研究文献资料显示具有泻肺平喘的功效，与桑白皮功效大致吻合，为桑白皮 药效主要成分之一，可作为桑白皮质量评价指标性成分。 3.建立原型入血成分桑皮苷 A 的含量测定方法：首先确定供试品溶液的制 备方法与 HPLC 色谱分析条件，然后进行了线性关系的考察，桑皮苷 A 的线性 回归方程为 y=4280.6x-15.768（r=0.9999），理论塔板数＞5000，线性范围为 0.1~1.0μg，平均回收率为 98.2%，方法学考察结果的 RSD 均小于 1%，表明此 1 方法简便、切实可行；测定结果表明：不同产地含量差距较大，南方产含量总 体高于北方产含量。 关键词: 桑白皮 指纹图谱 血清药化 含量测定 2 ABSTRACT Morus alba,a traditional Chinese medicine,was the dried root bark of mulberry Moraceae (Morus alba L.). They had the sweet,bitter,cold property,and were dominant to the lung with effect of inhibiting asthma and water swelling. Clinically, they were commonly used for treatment of hyperactivity cough, edema, puffiness oliguria, face skin edema. Recently, there were hundreds of Chinese medicines containing Morus alba and many kinds of literatures in the worldwide. The research mainly focused on the chemical ingredients and pharmacological effects. However, the study on fingerprints was penurious. To better establish quality standards of Morus alba, in the present study, qualitative identification was achieved based on the HPLC fingerprints. The material basis of efficacy was interpreted through preliminary study on serum chemistry of Morus alba,then comparing the differences and simila