高效液相色谱的基础知识精编版.pptVIP

高效液相色谱仪的注意事项 一、流动相 1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围； 2、水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质. 高效液相色谱仪的注意事项 二、样品 1、采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒； 2、用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液，尽量用流动相制备样品液 高效液相色谱仪的注意事项 三、操作过程 1、先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命； 2、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤； 3、 实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯； 1 高效液相色谱法的特点 2 高效液相色谱法仪器工作原理 3 高效液相色谱仪的维护 4 高效液相色谱法仪的注意事项 5 高效液相色谱的分析应用 高效液相色谱的分析应用 在食品安全检测中的应用 —乳制品中的三聚氰胺检测 —山梨酸,苯甲酸,等食品添加剂的检测 在食品营养标签检测中的应用 —氨基酸的检测 —维生素的检测 在其它行业中的应用 高效液相色谱的分析应用 氨基酸标样色谱图 高效液相色谱的分析应用 色谱柱：Agilent C18柱(4.6×150mm,5um)； 流动相：（PH4.8）0.02mol·L-1乙酸铵溶液-甲醇（39+61）； 流速量:1.0mL·min-1； 柱温：25℃ 检测波长：碱性橙2，430nm；碱性橙21、碱性橙22，480nm； 高效液相色谱的分析应用 色谱柱：Agilent C18柱(4.6×150mm,5um)； 流动相：（PH4.5）0.02mol·L-1乙酸铵溶液-甲醇（65+35）； 流速量:1.0mL·min-1； 柱温：25℃ 检测波长：230nm； THE END THANK YOU * 好课件要交流，浙教版初中科学课件交流QQ群瑞安市东山中学　杨直梭 QQ有点烦之家：/ 高效液相色谱的基础知识 1 高效液相色谱法的特点 2 高效液相色谱法仪器工作原理 3 高效液相色谱仪的维护 4 高效液相色谱法仪的注意事项 5 高效液相色谱的分析应用 高效液相色谱法的特点 高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色谱法优越性，现从两方面进行比较： 高效液相色谱法的特点 1．高效液相色谱法与经典液相色谱法 高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。由于经典色谱是重力加料，流出速度极慢；而高效液相色谱配备了高压输液设备，流速最高可达 103cm·min-1.例如对氨基酸分离，用经典色谱法，需用20多小时才能分离出20种氨基酸；而用高效液相色谱法，只需lh之内即可完成。 高效液相色谱法的特点 2．高效液相色谱法与气相色谱法 （l）气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的20％。对于占有机物总数近80％的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质，目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。 (2)气相色谱采用流动相是惰性气体，它对组分没有亲和力，即不产生相互作用力，仅起运载作用。而高效液相色谱法中流动相可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因此，流动相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了极大方便。 (3)气相色谱一般都在较高温度下进行的，而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。 高效液相色谱法的特点