硫辛酸对暴露于紫外线的人晶体上皮细胞作用的实验研究-眼科学专业论文.docxVIP

中文摘要目 中文摘要 目 的 现有的研究结果表明具有抗氧化作用的硫辛酸(1ipoic acid， LA)存在于人体的多种组织中。本研究用紫外线照射人晶状体 上皮细胞，并在紫外线照射前，照射时及照射后不同时段向介质中 加入不同浓度硫辛酸，通过细胞生存率值的比较来探讨硫辛酸在 人晶体上皮细胞中抗紫外线损伤的作用。 方 法 于含有20％胎牛血清的DMEM，5％CO：，37摄氏度的培养 条件下，对植入96孔培养板的人晶体上皮细胞(SRAOI／04)进行 培养。当培养细胞达到80％以上融合状态时对HLEC进行不同 强度的紫外线照射。紫外线光源参数为：波长范围为270— 410nm，中心峰值为310nm，照射高度为37cm，照射强度为0． 4mW／cm2，照射量为0，37，73，及110mJ／cm2。分别于照射前，照射 后用不同浓度(0mM，0．5ram，1．0mM)的硫辛酸对细胞进行2 小时的孵育，照射前将培养液换为PBS，PBS中加入不同浓度( 0mM，0．5ram，I．0raM)的硫辛酸。照射后的细胞在孵育后与照 射前相同条件下继续培养48小时，最后对所有细胞进行固定(2． 5％戊二醛)，染色(O．4％龙胆紫液)，标本自然风干后进行吸光度 值的测定，计算细胞生存率，最后进行统计分析。 ／ ／结 果 、∑ 于照射前，照射后加入硫辛酸孵育的实验组其细胞生存率明 显高于未加组，而在紫外线照射剂量为半数致死量时其增强细胞 存活率的作用最强。在照射剂量为半数致死量的73 mW／cm2及 1．5倍半数致死量的1 1．5倍半数致死量的1 10 mW／cm2条．件下其细胞生存率依次为：暴 露后硫辛酸加入组暴露前硫辛酸加入组暴露中硫辛酸加入组 至对照组，且l mM与0．5 mM硫辛酸加入组显示出同样的趋势， 、／ 本次实验没有发现浓度依赖性正相关关系。＼7 4 结 论 1．照射前，照射中，照射后硫辛酸的添加都能够提高紫外线照 射后晶体上皮细胞的生存率。 2．照射量73及llOmJ／cm2组中，照射后LA添加组照射前 LA添加组照射后LA添加组堇对照组，其中照射前及照射后添 加组与对照组间的差异有统计学意义。 3．1．0 mM硫辛酸添加组与0．5 mM硫辛酸添加组的结果呈 相同趋势，本实验中未见明显的浓度依赖性。 硫辛酸可以提高紫外线照射后的人晶体上皮细胞的存活率。 提示硫辛酸可以减轻紫外线对人晶状体上皮细胞的光损害。 关键词抗氧化损伤；人晶状体；上皮细胞；培养；紫外线；白 、 内障；硫辛酸 ·2· THE THE EFFECT OF a—LⅡ’OIC ACID AGAINST DAMAGES TO HUMAN LENS EPITHELIAL CELLS DI珏℃ⅡqG UVⅡUtADIATION Lipoic acid has been known as an oxidant present in a wide varie— ty of human cell types．The aim of this study WaS to determine Whether d—Lipeic acid enhance survival of human lens epithelial ceHs when exposed to ultraviolet(UV)irradiation in a culture system． Methods Human lens epithefial cell line SRA Ol—04 was cultured f 5％ C02，37℃，and 96一well plate)in Dulbeeco’S Modified Eagle Me— dium(DMEM)containing 20％fetal bovine serum．Sub confluent ceUs were incubated in DMEM(containing 20％fetal bovine sel31m)， with different coneentrafon of 0L—lipoic acid for 2 hours．DMEM (containing 20％fetal bovine serum)was changed to PBS(contai— ning different concentra60n of d—lipoic acid)before cells were irra． diated under a bank of UV lamps，which emitted 270—410 rim radia— tion witll a maximum at 3 10 Hill．’凸e UV intensity was 0．4 mW／cm2 at do