20XX年基因表达及功能分析基本策略.pptVIP

第二十六章 基因表达及功能分析的 基本策略 STRATEGIES FOR ANALYZING GENE EXPRESSION AND FUNCTION;第一节 基因表达的分析策略 Strategies for Analyzing Gene Expression;一、通过检测mRNA 揭示基因转录水平的表达特征;（一）基于杂交原理的方法可检测mRNA表达水平;Northern印迹分析原理示意图;2．核糖核酸酶保护实验 （ribonuclease protection assay，RPA） 可用于mRNA定量和RNA剪接分析 是一种基于杂交原理分析mRNA的方法，既可对mRNA进行定量分析又可研究其结构特征，灵敏度和特异性都很高。 ;核糖核酸酶保护实验原理示意图;可对mRNA进行区域定位 是利用杂交原理建立的组织原位mRNA检测技术，可对细胞或组织中原位表达的mRNA进行区域定位。同时也可作为定量分析的补充。 通过设计与目标mRNA碱基序列互补的寡核苷酸序列，标记后作为探针；该探针能够特异性地与目标靶序列杂交，检测标记信号来确定基因在组织和细胞内表达的区位信息。 虽然原位杂交在功能性方面提供的信息较少，但是该技术还是被广泛用于组织中的基因表达分析，这是因为其较高的稳定性、较广泛的靶点和组织适用性。;（二）两种变换的聚合酶链式反应是常用的mRNA检测方法; 常用于mRNA的定