联合使用异丙酚和异氟醚对大鼠心室肌细胞L-型钙离子通道影响的研究-心内科(ICU)专业论文.docxVIP

联合使用异丙盼和异氟醚对大鼠心室肌细胞L．型钙离子通道髟响的研究 联合使用异丙盼和异氟醚对大鼠心室肌 细胞L．型钙离子通道髟响的研究 研究生 王金波 导 师 王可富 中文摘要 异丙酚和异氟醚是目前临床上常用的静脉、吸入麻 醉药，临床使用过程中常遇见病人有血压降低的现象。 为了探讨异丙酚和异氟醚对心肌细胞的抑制作用及其作 用机理，本实验利用全细胞膜片钳技术，从细胞膜离子 通道水平，更全面、更精确地研究联合使用异丙酚和异 氟醚对大鼠心室肌细胞膜L．型钙离子通道电流的影响， 阐明异丙酚和异氟醚在离子通道水平上对心肌细胞产生 抑制的药理作用机制。 一体实验采用急性酶解法获得SD大鼠的单个具有活 性的心室肌细胞，在保持膜片钳钳夹电位．40mV，波宽 为250ms，频率为o．1Hz的刺激参数下，观察不同浓度 的异丙酚、异氟醚及其二药复合应用时对心肌细胞膜L． 型钙离子通道电流的影响。 在保持电位为．40mV，指令电位从．50--50mV，刺 在保持电位为．40mV，指令电位从．50--50mV，刺 激波宽为250ms，频率为o．1Hz的刺激参数下，以10mY 的间距给予去极化脉冲时，可记录到不同钳压条件下的 钙离子通道电流，所做的曲线呈倒钟状，可显示当指令 电位为0mV时，出现最大峰电位，为512±78。 用含有1“mol／L四已铵的台氏液灌流分离好的心 肌细胞时，可记录到具有电压和时间依赖性内向的钙电 流；加入l umol／L维拉帕米时，该电流被迅速消除。 证明此通道电流为L一型钙离子通道电流． 在灌流液中，当加入12 umol／L、25 umol／L异丙 酚时，以不加麻醉药时所得的钙离子通道电流为参考 值，与加入麻醉药后所得的钙离子通道电流值进行统计 学处理得到P=0．480．05(n=6)。这说明灌流液中加入 12“mol／L、 25 u mol／L异丙酚，对钙离子通道电流的 影响无显著性差异。 在灌流液中，当加入7×102 u mol／L、1．1×103“ mol／L异氟醚时，以不加麻醉药时所得的钙离子通道电 流为参考值，与加入麻醉药后所得的钙离子通道电流值 进行统计学处理得到P=o．150．05(n=6)。这说明灌流 液中加入7×102lLJmol／L、】．1×103“mol／L异氟醚，对 钙离子通道电流的影响无显著性差异。 在保持电位为．40mV，波宽为250ms，频率为0．IHz 的刺激参数下，用含有50 的刺激参数下，用含有50 umol／L异丙酚的台氏液灌流， 以10mV的间距给予去极化脉冲时，可记录到不同钳压 条件下的钙离子通道电流，取得此时钙电流I．v曲线， 统计SD大鼠心室肌细胞灌流前后的I．V曲线变化。发 现50 u mol／L异丙酚抑制任何一膜电压下的钙离子通道 电流，其最大激活电压仍为0mV，l_V曲线显著上移， 原有的电流电压依赖特性无明显改变。异丙酚对L．型钙 离子通道电流具有一定程度的浓度依赖性抑制作用，并 使其I．V曲线均上移，但均不改变峰值、激活和反转电 位，提示异丙酚于不同膜电位水平对L．型钙离子通道电 流具有均匀一致的抑制作用。 在灌流液中加入250¨mol／L异丙酚时，以不加麻 醉药时所得的钙离子通道电流为参考值，与加入麻醉药 后所得的钙离子通道电流值进行统计学处理得到P =0．00010．05(n=6)。这说明灌流液中加入250 u mol／L 异丙酚，对钙离子通道电流的影响有显著性差异。 在灌流液中加入2．2×103“mol／L异氟醚时，以不 加麻醉药时所得的钙离子通道电流为参考值，与加入麻 醉药后所得的钙离子通道电流值进行统计学处理得到尸 =o．0001o．05(n=6)。这说明灌流液中加入2．2 x 103“ mol／L异氟醚，对钙离子通道电流的影响有显著性差异。 在灌流液中加入4．4×103|Jmol／L异氟醚时，以不 加麻醉药时所得的钙离子通道电流为参考值，与加入麻 加麻醉药时所得的钙离子通道电流为参考值，与加入麻 醉药后所得的钙离子通道电流值进行统计学处理得到P =o．0001o．05(n=6)。这说明灌流液中加入4．4×103 u mol／L异氟醚，对钙离子通道电流的影响有显著性差异。 在灌流液中，当加入25 umol／L异丙酚和1．1 X 103 pmol／L异氟醚复合剂时，以不加麻醉药时所得的钙离 子通道电流为参考值，与加入麻醉药后所得的钙离子通 道电流值进行统计学处理得到P=o．0001O．05(n=6)。 这说明灌流液中加入25“mol／L异丙酚和1．1×103 u mol／L异氟醚复合剂，对钙离子通道电流的影响有显著 性差异。 在灌流液中，-3加入125 u mol／L异丙酚和2．2×103 “mol／L异氟醚复合剂时，以不加麻醉药时所得的钙离 子通道电流为参考