测定ATP总量2萤火虫发光试验.pptVIP

生物界以ATP为“中介”的能量转换 关于ATP的系列实验研究 1.验证细胞内的ATP含量处在动态稳定中 2.萤火虫发光实验：探究ATP和葡萄糖对生物发光的效应 3.探究肌肉收缩的直接能源是ATP还是葡萄糖。 将动物的肝细胞研磨并除去 ATP后，分别被放入3只标号 为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的锥形瓶中。 实验装置和处理如图a所示。 将实验用的3只锥形瓶的瓶口 密封后，放入20℃水浴锅 中，1h后的结果如图b所示。 肌肉供能相关供能曲线 * 能量货币 脱水 E1 E2 ATP A－P～P～P +H2O 化学能（生物合成） 渗透能（控制物质进出细胞， 主动运输、胞吞和胞吐） 电能（神经冲动传导，膜电位维 持和恢复，突触传递） 热能（体温维持如寒战时） 机械能（细胞运动，肌纤维收缩 、纤毛和鞭毛摆动、染 色体运动、细胞质分裂） 光能（生物发光） ADP＋ Pi 合成 水解 储能 释能 能量 绿色植物、 蓝细菌、光合细菌 光合作用 （光反应） 太阳能 化学能 硝化细菌 人辅助能源 独立代谢的 细胞生物 NH3等无 机物氧化 呼吸作用 磷酸肌酸 能量转移 生理作用 生物类型 反应场所 转换后的 能量形式 循环使生命活动 简约、高效！ ATP与ADP 相互转化的 场所、能量、 酶均不同， 仅物质可逆 预期结果：培养前后，ATP总量不变，但培养后部分ATP出现放射性。 结论：原有ATP部分被分解，部分ATP又重新合成。 细胞内ATP含量处在动态稳定中。 方法：用含32P－H3PO4的培养基培养动物细胞，短时间分离出细胞中的ATP，测定ATP总量和放射性。同时进行对比实验，测定ATP总量。 【方法步骤】（前期准备+3斧头） ①将萤火虫发光器研成粉末。 ②取两组洁净试管编号1、2；各加入2ml水和等量发光器粉末。 ③一段时间后各加入1mlATP或葡萄糖溶液。 ④观察并记录结果。 【现象】加入ATP溶液发出荧光、加入葡萄糖溶液不发荧光 【结论】ATP是直接能源物质，葡萄糖不是直接能源物质。 细胞只有保持完整性，才能正常完成各项生命活动。 【分析与讨论】 ●为何要把发光器研成粉末状？破坏细胞结构，便于观察ATP和葡萄糖对生物发光的直接效应，因为葡萄糖可以被细胞利用。 ●为何要加入一定量的水？提供良好的反应介质。 ●为何开始时，两管均会出现较短时间的荧光？因为发光器粉末中原本存在的少量ATP在ATP水解酶的作用下供能。 ●为何一定时间后加入葡萄糖不再发出荧光？ 原有ATP被消耗，由于细胞结构被破坏，葡萄糖不能氧化供能。 【方法步骤】 ①制备新鲜的骨骼肌标本2个，标号A、B。 （离体，否则无法排除机体供能的干扰） ②适宜刺激，消耗肌肉中的ATP和能源。 （以保证实验结果的准确性） ③给A标本滴加ATP溶液，B标本滴加葡萄糖溶液，施以适宜刺激，观察是否收缩。 （施加实验变量，控制无关变量 ） ④再给B标本滴加ATP，施以适宜刺激，观察是否收缩。 （自身对照，进一步确认ATP是直接能源） 【预期最可能的结果】滴加ATP溶液后，适宜刺激下肌肉收缩；滴加葡萄糖溶液后，适宜刺激下肌肉不收缩，再滴加ATP并施以适宜刺激，肌肉收缩。 【结论】肌肉收缩的直接能源是ATP，不是葡萄糖。 ●该气体密闭装置测得的是何种气体变化量？说出实验原理。 ●说出本实验中的对照组。 Ⅲ号为对照组。 ●描述实验现象 Ⅲ号锥形瓶酒精液滴在玻璃管中向左移动。 ●实验现象表明了什么？Ⅲ号锥形瓶中发生了有氧呼吸。 4.呼吸作用为生命活动供能。呼吸作用需要哪些条件？ ●该实验的全部结果说明（结论） 肝细胞呼吸作用需要葡萄糖和ATP 肌细胞ATP产生量与O2%的关系 ATP产生量 O2% 肌细胞 肌细胞的线粒体 无氧条件下， 丙酮酸、脂肪酸 不进入线粒体 100% 剧烈运动时肌肉3个系统供能相对值 时间 供能百分比 ATP—C~P 无氧呼吸 有氧呼吸 长跑锻炼（中等强度）时肌细胞中有关物质浓度的变化 时间 相对含量 O2显著 下降 CO 2增多，但因不断排出而不再上升 乳酸 少→多 关注供能顺序 关注因果联系 *