老年性耳聋患者内皮祖细胞功能研究-医学专业论文.docxVIP

恻唰恻qJV阳阳川川KJW川刷 恻唰恻qJV 阳阳川川KJW 川刷刷 咱 ， 恻唰唰A『 川川附qJw m川川00 川唰恻叩AEE 州 州州Y 老年性耳聋患者内皮祖细胞功能研究 研究生z 玉蕾 指导教师 z 赵玉林教授 郑州大学第一附属医院耳鼻喉科 河南郑州 45ω52 摘要 背景和目的 耳聋是影响人类生活质最和导致终生残疾的主要问题之一。估计全球昕力受 损人数大约有 2川亿人，其中 2/3 在发展中国家。昕力损害不仅对患者影响巨大， 而且已成为一项严重的社会问题，成年的昕力损害已是全球十大致残原因之一， 超过 50%的 65岁以上老年人均有昕力损害。我因为发展中国家，且随着社会经 济发展，社会老龄化越来越严重。老年性耳聋是伴随年龄老化(一般发生在 60 岁以上)阳发生的昕觉系统退行性变导致的耳聋。其原因与耳部微血管退化、耳 蜗病变以及全身机能退化密切相关。老年性耳聋耳部微血管退化，这可能和耳部 微血管损伤修复和再生能力较差有关。在血管损伤的修复和再生中内皮祖细胞 (endothelial progenitor cel1s，EPCs) 起着重要的作用。 EPCs 表达多种内皮标志， 并可以整合到缺血区域的新生血管中。研究表明某些生理条件、疾患和药物等多 种因素均能对内皮祖细胞的动员、迁移、定腊、整合和分化等功能产生明确的影 响。机体的衰者、吸烟等不良嗜好、缺乏体育运动、心肌梗死、高血压病、心绞 痛、脑梗死、 I型和 11 型糖尿病等均可导致 EPCs 数目减少，功能下降。老年性 耳聋患者内皮祖细胞功能如何变化，目前还鲜见报导。我们对老年性耳聋患者外 周血循环中的 EPCs 功能进行研究，并与年龄相匹配的健康老年人外周血循环中 的 EPCs 功能对比，以探讨老年性耳聋患者 EPCs 的功能变化，并进一步探讨老 年性耳聋发生的可能机理。 材料和方法 1. 病人资料和分组老年性耳聋病人 16 例，其中女?例，男 9例，年龄 60-69 岁，平均 64.7 岁。发现耳聋病史 9 个月至 2 年 3 月，耳聋分级为中度的患者， 中文摘堕郑州大学 中文摘堕 郑州大学 2ω9 崩硕士学位论文 11 11 其语频昕阙在 4155础。排除可能对 EPCs 有影响的药物应用史和其他近期 疾病史。对照组健康老年人为体检者 16 例，其中女 7 例，男 9 例，年龄 6068 岁，平均 65.5 岁。 2. 外周血内皮祖细胞的分离、培养 取研究对象外周静脉血空腹 IOm1，用人淋 巴细胞分离液进行密度梯度离心法获得单个核细胞，并在 M199 培养基中培 养(含 20%胎牛血清和生长因子)。培养第 7 天多波长激光共聚焦显微镜鉴定， FITιUEA-I 和 Dil-acLDL 双染色阳性细胞为正在分化的 EPCso 3. 内皮祖细胞集落和细胞计数、粘附、增殖、迁移能力检测第 7 天计数两组 EPC 集落和细胞数目，然后消化、收集部分培养的 EPCs 分别进行下列实验。 粘附能力测定:细胞接种密度为 1x IOs个/时，接种到预先人纤维连接蛋白(1 ngl μ1)包被的培养板中培养 3伽nin，计数贴壁细胞。增殖能力测定:细胞密度为2 X 103 个/时，用 M啊‘细胞增殖及细胞毒性试剂盒测定巴 PCs 的增殉能力。迁移 能力z 细胞密度为 2XI04 个/时，采用改良的 Boyden 小窒法培养 24 小时， 计数迁移到小窒下层的细胞数。 结果 老年性耳聋患者外周血内皮祖细胞体外培养 EPCs 集落计数为1.40 士0.37; 即Cs 计数为 54.32 士9.24; 粘附细胞计数为 17.32士5.18; EPCs 吸光度为 0.154 士 0.042; 迁移到 Boyden 小室底层的 EPCs 数因为 11.18士2.73. 对照组外周血内 皮祖细胞体外培养 EPCs 集落计数为 2.88士0.48; EPCs 计数为 67.64 士 8.39; 粘 附细胞计数为 22.58士5.46; EPCs 吸光度为 0.226 土 0.574; 迁移到 Boyden 小宽 底层的 EPCs 数目为 15.72土 3.430 与对照组相比，老年性耳聋患者组 EPCs 集落 和细胞计数、粘附能力、增殖能力、迁移能力均下降，具有显著性统计学差异 (P0.05) 。 结论 老年性耳聋患者外周血内皮祖细胞体外培养细胞计数、粘附、增殖、迁移能 力下降:内皮祖细胞功能下降可能为老年性耳聋的发病机理之一。 关键词g 老年性耳楚:内皮祖细胞:细胞集落:细胞粘附:细胞增殖:细胞迁移 郑州大学 郑州大学 2ω9 届酬七学位论文 英文摘要 The function of endothelial progenit