rubisco活化酶基因反义表达载体的构建跟水稻的遗传转化新.pdf

遗 传 ! !# $ 研究报告 !#$%’( )*++- ! ##$ ##!%% ! ,. ! 活化酶基因反义表达载体的构建 L+27D:- 与水稻的遗传转化 $ $ $ $ ! $ 金松恒 !翁晓燕 !王妮妍 !李雪芹 !毛伟华 !蒋德安 ! 浙江大学生命科学学院 植物生理与生物化学国家重点实验室$杭州 ) $M ’$%%!G 浙江大学 分析测试中心$杭州 !M ’$%%!G 摘 要!利用 * 获得了 基因两端可以引入与双元表达载体 多克隆 NFEI06D O9+0D:.7/P*Q LR REOSR$’%$ ! , 3 , , , 位点相匹配的单酶切位点$将该片段连接到 载体$构建了 基因的反义植物表达载体 ( REOSR$’%$ LR REL%! , , 通过电激法将该载体导入根癌农杆菌 菌株中$以根癌农杆菌介导的方法$将反义载体 REL%!转化粳稻 FTR$%( , 品种中花 $获得了抗潮霉素的再生植株$经过 组织化学检测和 鉴定结果表明$目的基因确已经整合到 $$ /0( ?L 这些转基因水稻基因组中(表型测定显示$大部分反义水稻不能在大气 U 浓度条件下生长$存活下来转化株也 ! 是生长缓慢$植株瘦小$ 和 含量发生了明显改变$这对研究水稻 与 的相互作用和调控关 LR L+27D:- LR L+27D:- 系具有重要意义( 关键词!水稻) 活化酶)反义)载体构建)遗传转化 L+27D:- 中图分类号! $ 文献标识码! 文章编号! ! V)#( VG’ R %!(’JG))! !%% %J%##$J% ! ! ! ! ! !