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实验二 细胞生理活动的观察 实验目的 1、观察和理解小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程,理解细胞膜功能中的的胞吞作用。 2、观察动物红细胞在不同渗透压溶液中的溶血现象,理解细胞膜的选择通透性和物质交换功能。 一、细胞吞噬活动的观察 小白鼠腹腔注射淀粉肉汤 注射鸡红细胞悬液 处死小鼠,吸取腹腔液 制作腹腔液涂片1张(作记号),晾干 直接滴加试剂二 6滴,轻摇玻片,染色5-8’ 水洗30”,晾干,镜检 2~3天 滴加试剂一3滴,染色1 ’ 血涂片的制备 血涂片的制备 在不同相对分子量、脂溶性大小以及电解质和非电解质等各种溶液中, 红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同。由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同。因此,通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度,从而测量各种物质通透性的差别。 二、细胞膜的通透性 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。 未溶血 溶血 渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压,使水进入红细胞,引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液,使溶液呈现透明即溶血。 每组(2人)取3支试管,分别编号1,2,3 观察各管溶血现象,记录结果 各取三管1滴的细胞悬液滴于载玻片上,盖片 各加入1滴兔红细胞悬液(摇匀) 显微镜下观察细胞形态 蒸馏水(1号管) 三管分别加入2ml 0.9 %NaCl (2号管) 1.6 %NaCl (3号管) 水的渗透现象 每组(2人)取2支试管,分别编号1,2 各加入1滴兔红细胞悬液 观察各管溶血现象,记录溶血时间 乙二醇(1号管) 丙三醇 (2号管) 2管分别加入2ml 注意事项 1. 溶血现象可用一张有字的白纸来辅助识别,能够清楚地透过溶液看到溶液后方纸上清晰的字迹时,为完全溶血。 2. 因相对分子质量大小对膜通透性有影响,所以将溶血时间适当地延长至15min,15min时 仍然不溶即判断为不溶血。 3. 注意同组实验过程的同步性,尤其滴加血液的操作要迅速。 三、实验报告 1、分别绘出高倍镜下的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同吞噬阶段图(未吞噬、正在吞噬及已吞噬,标注其中一组)。 2、分别绘出3个在低渗、等渗和高渗溶液状态下的兔红细胞形态,并写上和简单分析它们各自的溶血现象的结果。 3、说明分子量或脂溶性大小不同的物质对细胞膜通透性的影响。 * 04级------2004.10 * 04级------2004.10
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