溶血性贫血的一般实验室检查诊断学乙.ppt

红细胞大小不均anisocytosis 红细胞大小悬殊，直径可相差一倍以上 反映骨髓中红细胞增生明显旺盛 见于增生性贫血，而在巨幼细胞贫血中尤为明显 嗜多色性 红细胞呈淡灰蓝或紫灰色，是未完全成熟的红细胞，体积较正常红细胞稍大，胞质呈嗜碱性着色的物质为少量残留的核糖体、线粒体等成分 其增多反映骨髓造血功能活跃，红细胞系增生旺盛。见于增生性贫血，尤以急性溶血性贫血时为最多见 嗜碱性点彩 细胞内见到散在的大小和数量不一深蓝色颗粒。点彩红细胞属于未完全成熟的红细胞，有时与嗜多色性并存 多见于铅中毒及骨髓增生旺盛的贫血如溶贫，巨幼贫 染色质小体 又称豪－乔小体，为紫红色圆形小体，是核染色质的残留部分 常见于骨髓增生旺盛的贫血如溶贫，巨幼贫等 卡波环（Cabot) 一种紫红色成圆形或8字形细线状环。可能是纺锤体的残余物或是胞质中脂蛋白变性所致 常与染色质小体同时出现，见于溶血性贫血、巨幼细胞贫血、铅中毒及白血病等 有核红细胞 有核红细胞即幼稚红细胞，均存在于骨髓中，正常人外周血中不能见到，在出生一周之内的新生儿外周血中可见到少量。 成人外周血中出现有核红细胞，即属病理现象。见于：①各种溶血性贫血②红白血病③髓外造血④骨髓转移肿瘤 二、哪一类溶血性贫血？ （一）红细胞膜缺陷的检测 1. 渗透脆性试验 【原理】是测定红细胞对不同浓度低渗氯化钠溶血的抵抗能力。主要取决于红细胞表面积与体积之比 【参考值 】 开始溶血：0.42%～0.46%（4.2～4.6g/L）NaCL 完全溶血：0.28%～0.34%（2.8～3.4g/L）NaCL 【临床意义】 （1）脆性增高 遗传性球形红细胞增多症（开始溶血5.2g/L，甚至在6.8g/L即开始溶血） （2）脆性减低 小细胞低色素性贫血：海洋性贫血、缺铁性贫血 2. 红细胞孵育渗透脆性试验 【原理】 37℃孵育24小时，细胞内葡萄糖消耗增加，ATP减少，钠离子泵出减少，细胞膨胀脆性增高 【参考值】 未孵育 50%溶血4.0~4.45 g/L 孵育 50%溶血4.65~5.9 g/L 【意义】 脆性增高 遗传性球形红细胞增多症 脆性减低 缺铁性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH) 一种后天获得性血细胞膜缺陷的克隆性疾病，临床上可表现血管内溶血、栓塞、全血细胞减少等 PNH患者红细胞膜表面缺乏加速衰变因子（DAF，CD55）反应性溶血的膜抑制物（MIRL，CD59）等，使红细胞对补体敏感而溶血 上述3种蛋白都经糖基化磷脂酰肌醇(GPI)连接在细胞膜上，称为GPI锚连蛋白。 GPI锚连蛋白缺失是由于体细胞发生X连锁的PIG-A基因突变造成的 3. 酸溶血试验 (Ham试验) 【原理】 膜蛋白缺陷的红细胞对补体敏感增加，在弱酸血清（pH6.6~6.8）中，经37℃ 孵育后红细胞发生溶血 【临床意义】 正常人阴性，阳性见于阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）。该法敏感性较高。特异性高 Ham试验 PNH不同时间尿样 4. 蔗糖水溶血试验 【原理】 蔗糖离子浓度低，增强补体与红细胞结合，使红细胞膜上形成小孔，蔗糖进入红细胞而致溶血 【临床意义】 正常阴性 PNH本试验常为阳性。可作为PNH筛选试验，阴性可排除，阳性应作Ham 试验 5. 蛇毒溶血试验 【原理】 蛇毒因子是种溶血因子，能直接激活补体C3，激活补体系统，造成溶血 【参考值】 溶血度5% 【临床意义】 阳性提示PNH 6. CD55 CD59检测 【原理】 CD55，CD59是补体调节蛋白，具有GPI锚定蛋白作用。PNH患者红细胞和粒细胞上GPI锚缺陷，无法结合在细胞膜上，导致对补体敏感，容易发生溶血。 【参考范围】 外周血中CD55，CD59阴性红细胞和中性粒细胞均5％ 【临床意义】PNH患者该类细胞10％ PNH诊断 1.初筛试验 血管内溶血的特点：血浆游离血红蛋白增高，结合珠蛋白(Hp)降低，血红蛋白尿及尿中出现含铁血黄素等 2.诊断试验 酸化血清溶血试验(Ham’s试验)、蔗糖溶血试验、蛇毒因子溶血试验等 3.特异的诊断PNH的实验方法 CD55和CD59检测：用双色荧光流式细胞术检测PNH患者红细胞膜上的CD55和CD59，当PNH患者的CD59阴性细胞占3％以上时即可检出 （二）红细胞内酶缺陷的检验 1. 自身