研究菌体的培养规律、外界控制因素-对过程影响及如何优化课件.pptVIP

发酵前期，需氧量不断增加，此时需氧量超过供氧量，使溶解氧明显下降，摄氧率同时出现一个高峰 发酵中后期，分批发酵溶解氧变化较小，如不补加基质，发酵液的摄氧率与菌体的呼吸强度变化不大，供氧能力保持不变，溶解氧浓度变化也不大 当外界进行补料时，则溶解氧浓度就会发生变化，如补糖后，发酵液的摄氧率就会增加，引起溶解氧浓度下降，经过一段时间后又会逐步回升 生产后期，呼吸强度减弱，溶解氧浓度也会逐步上升 引起溶解氧异常下降的主要原因 污染好气性杂菌 菌体代谢发生异常，需氧量增加，使溶解氧下降 某些设备或工艺控制发生故障或变化，可能引起溶解氧下降 引起溶解氧异常升高的原因 在供氧条件没有发生变化的情况下，主要是耗氧发生改变所致，如菌体代谢出现异常、耗氧能力下降，特别是污染了烈性噬菌体，影响尤为突出 供氧方面 OTR=kLα(c*-cL)=(QO2)m cLc(X) Ko+cL 设法提高氧传递的推动力，如增加罐 压、采用富氧通气操作 提高液相体积氧传递系数kLα,（如调 节搅拌转速或通气速率，或改变发酵 液的流动状态等） 需氧方面 发酵液的需氧量受菌体浓度、基质的种类和浓度以及培养条件等因素的影响 发酵液的摄氧速率随菌体浓度的增加而按比例增加 氧的传递速率是随菌体浓度的对数关系减少 控制补料速度，使微生物菌体浓度维持在最适范围内 调节温度 液化培养基 中间补水 添加表面活性剂 菌体浓度对发酵的影响及控制 基质对发酵的影响及其控制 菌体浓度(cell concentration)是指单位体积培养液中菌体的含量。 菌体浓度的大小，在一定条件下不仅反映了菌体细胞的多少，而且反映了菌体细胞生理特性不完全相同的分化阶段 菌体浓度的大小与菌体生长速率密切相关，比生长速率大的菌体，菌浓增长迅速，反之就缓慢 菌浓的增长与营养物质和环境条件密切相关 生长速率取决于基质浓度 当c(S) ＞10KS时，μ≈μm,在此限度内，菌体的比生长速率随基质浓度的增加而增加。超过此限度，基质浓度的增加会引起生长速率下降 μ c(S) = μm Ks + c(S) 菌浓的高低，对发酵产物的得率有着至关重要的影响,在适宜的比生长速率下，发酵产物的产率与菌体浓度成正比例关系，即： P=(QP)mc(X) 但菌浓过高，可能会改变菌体的代谢途径，对溶解氧的影响尤为突出 随着菌体浓度的增加，培养液的摄氧率按比例增加，表观黏度也随之增加，流体的性质亦发生改变，使氧的传递速率成对数减少 当OUROTR，溶解氧减少，并成为限制性因素，随之给发酵带来各种影响 r =QO2c(X) 如代谢途径的改变，酵母生长停滞；抗生素发酵中，使产量下降等 确定基础培养基的适当比例，以避免菌体浓度过浓（或过稀） 通过中间补料控制菌体的生长，当菌体生长缓慢，菌体浓度过低时，可补加部分磷酸盐，以促进其生长 可利用菌体代谢产生的CO2的量来控制生产过程的补糖 碳源对发酵的影响及其控制 氮源的种类和浓度对发酵的影响及其控制 磷酸盐浓度对发酵的影响及其控制 迅速利用碳源： 能较快地参与代谢，合成菌体和产生能量，并产生分解产物，有利于菌体生长，但有的分解代谢产物对产物的合成可能产生阻遏作用 缓慢利用碳源： 被菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成，特别有利于抗生素的分泌期，为许多微生物药物发酵所利用 碳源浓度对菌体代谢、产物的形成及氧的传递都会产生影响。浓度过大，导致菌体异常繁殖 如产生阻遏作用的碳源用量过大，产物的合成会受到明显的抑制 若仅仅提供维持量的碳源，均提的生长和产物合成都会停止 发酵过程中通过中间补料的方法来控制 这主要是根据不同的代谢类型来确定补糖时间、补糖量和补糖方式 不同种类和不同浓度的氮源都会影响产物的合成方向和产量 快速利用氮源易被菌体利用，可促进菌体生长，但对某些代谢产物的合成，尤其是对某些抗生素的合成产生调节作用，影响产量 缓慢利用氮源对延长次级代谢产物的分泌期，提高产物的产量是有益的，但不可一次投入 发酵培养基选用含有快速利用和缓慢利用的混合氮源 发酵过程中补加氮源 补加有机氮：根据产生菌的代谢情况，可在发酵过程中添加某些具有调节生长代谢作用的有机氮（如酵母粉、玉米浆、尿素等） 补加无机氮源：补加氨水或硫酸铵 磷是菌体生长繁殖和合成代谢产物所必需的成分 微生物生长良好所必需的磷酸盐浓度0.32~300mmol/L，但对于次级代谢产物合成良好所允许的最高平均浓度仅为1.0mmol/L 磷酸盐浓度的控制，一般是在基础培养基中采用适当的浓度 在发酵过程中，有时会出现代谢缓慢的情况，可补加磷酸盐改善 CO2对菌体生长和产物形成的影响 排气中CO2浓度与菌体量、pH值、排气氧之间的关系 呼吸商与发酵的关系 CO2浓度的控制 CO2对往往菌体生长有直接的影响。当