疟原虫镜检(不要外传).pptVIP

2.厚血膜中疟原虫形态 间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫 恶性疟厚血膜 厚血膜恶性疟原虫 间日疟：小滋养体胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间断裂，或围绕核。间日疟原虫的环较大，常呈分号“；”和感叹号“！”状。 恶性疟:恶性疟原虫的环纤细，常呈分号“：”、飞鸟“⌒.⌒”、V状和断环状。 厚血膜间日疟和恶性疟的区别 膜间日疟和恶性疟原虫混合感染的鉴别 容易鉴别的混合感染 同一血膜中发现Pv.疟各期原虫和Pf.雌雄 配子体。 同一血膜中发现大量纤细的恶性疟环状体， 并混有少量间日疟原虫。 不易鉴别的混合感染 Pv.各期原虫和粗环的Pf.环状体。 仅有Pv.和Pf.的环状体。 间日疟原虫 恶性疟原虫 环状体 核较大，胞浆粗厚，常有伪 核较小，常见2个核，胞浆纤细 大滋养体 虫体较大，胞浆呈阿米巴运动，有薛氏点 在末稍血不常见，虫体呈不规整圆形，有黑色疟色素团块 裂殖体 有12～24个裂殖子 有18～36个裂殖子 配子体 雌性核偏于一侧，致密，雄性位于中央，疏松 雌性呈新月形，雄性呈腊肠形 疟色素 黄绿色，短杆状 散在呈金黄色，集成团块呈黑褐色 其他 各期均能查见 一般只能查见环状体和 配子体 厚血膜间日疟和恶性疟鉴别要点 被寄生红细胞形态 间日疟 恶性疟 胀大色浅，薛氏点鲜红色。细小，数多 大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色。粗大，数少 大配子体和大殖养体的形态区别 大配子体 大滋养体 虫体大小 几乎充满被寄生的红细胞 不超过被寄生红细胞的3/4 核 一个，较大且致密，周围有一圈空白的不染色带 一个，延长呈带状， 周围无明显的不染色带 胞浆 边缘清楚，不含空泡 边缘不整齐，多有空泡 疟色素 颗粒较多较粗，均匀散在 颗粒较少较细，分布不均匀 寄生的红细胞经染色后，因细胞内血红蛋白溶解，轮廓消失，但有时尚留下残骸的“影子”或点彩。 厚血膜由于用血量多，血膜小，细胞重迭，干燥缓慢，各期疟原虫的体积都略为缩小，其中只有大、小滋养体的形态有较大改变，而裂殖体和配子体的形态则无明显变化。 疟原虫－厚血膜形态变异 小滋养体 胞浆呈环状或向核的一侧 或两侧收缩，使环的中间断裂，或围 绕核。 间日疟原虫的环较大，常呈分号“；” 和感叹号“！”状 恶性疟原虫的环纤细，常呈分号“：” 、飞鸟“⌒.⌒”、V状和断环状 三、疟原虫镜检技术 血涂片制作 染色 注意事项 疟原虫计数 （一）血涂片制作 1.材料 （1）载玻片 （2）采血针：使用一次性采血针。 （3）75％酒精棉球： （4）记号笔： （3）玻片盒：防污染、防苍蝇。 2、采血的部位和方法 以耳垂采血较为合适，也可在手指末端采血。先用75%酒精棉球消毒采血部位，待酒精干后，左手拇指和食指紧捏采血部位，右手持一次性采血针迅速刺入采血部位1～2mm深，然后用左手拇指和食指和右手中指协同挤出血滴。 3、涂制血膜 取玻片2张，1张作载片，1张作推片用右手拇指和食指夹持推片侧缘中部。用推片的左下角刮取血液4～5μl，再用该端中部刮取血液1～1.5μl。将左下角的血滴涂于载片的中央偏右处，由里向外划圈涂成直径为0.8～1cm的圆形厚血膜。用干棉球抹净角上的血渍，然后将推片下缘平抵载玻片的中线，当血液在载玻片与推片之间向两侧扩展至约2cm宽时，使两玻片保持25～35角，从右向左迅速向前推成舌状薄血膜，厚度应以红细胞之间互相接触而不相互重叠为佳。 4. 厚、薄血膜的位置 根据需要，每张载玻片上可做1个薄血膜、或1个厚血膜和1个薄血膜、或1个薄血膜和2个厚血膜、或2个薄血膜和2个厚血膜，或1张载片上制作多个厚血膜等。 目前推荐每张载玻片上1个厚血膜和1个薄血膜。 5. 染色前血膜的保存 血膜制成后，立即将受检者号码写在玻片上，血膜朝下插入直竖的标本盒内，让血膜自然干燥后才能染色。薄血膜在染色前须经甲醇固定，而厚血膜在染色前必须溶血，但新制作的厚血膜也可直接染色。血膜放置时间，夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否则厚血膜会自然固定而不能溶血，影响镜检。不能及时染色的血膜，可先用甲醇固定薄血膜，将厚血膜溶血，晾干后包好，放入干燥器中，置于冰箱内保存。临用时，将干燥器放置室温中1～2小时后取出血片。 （二）染色 1.染色液的制备 常用的血膜染剂有吉氏和瑞氏两种。吉氏染剂不仅适用于厚血膜和批量血膜的染色，而且效果稳定，染色时间和染液浓度对染色结果影响较小，染色后的血膜保存时间较长，同时吉氏染剂能长期保存而不变质，染色技术也易掌握，被推荐使用