生物化学-06-生物氧化与氧化磷酸化.pptVIP

* F1-F0-ATPase结构示意图 F0贯穿线粒体内膜，由十多种亚基组成，含有质子通道。 F1是球形头部，伸到线粒体基质中，催化ATP的合成。 氧化磷酸化重建示意图 亚线粒体泡，具有氧化磷酸化功能。 氧化磷酸化重建实验证明了呼吸链和F1-F0-ATPase的结构与作用机理的论述。 1、根据氧化还原电位差判断: ΔG○, =-nFΔE○, ΔE○, 0.16V ΔG○, 30.5KJ/mol NADH (-0.32) 电位 FMN (-0.30)  Fe-S CoQ Cytb Fe-S ( 0.04)  (-0.02) ( 0.10) ( 0.00) (0.22) Cytc1 Cytc (0.25)  Cyta (0.29) 能量 Cyta3 (0.55) O2 (0.82) 二、氧化磷酸化的偶联部位 P/O ：每消耗一个氧原子（或每对电子通过呼吸链传递至氧）所产生的ATP分子数。 实验证明：线粒体中的NADH经ETS氧化，P/O=3，FADH2经ETS氧化，P/O=2 3、偶联部位： NADH CoQ 复合物Ⅰ  Cytb Cytc1 复合物 Ⅲ  Cytaa3 O2 复合物 Ⅳ 2、根据P/O判断 根据不同载体的E0′值证明由NADH到分子氧的电子传递链中，有三处能使氧化还原过程所释放的能量足以合成ATP。 磷氧比（ P/O ） NADH FADH2 H2O H2O 例 实测得NADH呼吸链： P/O~ 3 ADP+Pi ATP 例：实测得FADH2呼吸链： P/O~ 2 O2 1 2 2e- 2e- ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP O2 1 2 1molG经EMP-TCA-ETS彻底氧化生成38mol ATP（或36） 38×30.5 贮能效率： ×100% = 40.3% 2876.5 4、氧化磷酸化的贮能效率 1、化学偶联假说：电子的传递过程中形成高能中间物，释放能量，使ADP生成ATP。 三、氧化磷酸化的机理 （一）能量偶联假说 这一假说的典型例子是G-3-P脱氢酶所催化的产能和贮能过程以及PEP形成丙酮酸并生成ATP的反应。 G-3-P +Pi 1,3-DPG NAD+ NADH＋H+ G-3-P脱氢酶 1,3-DPG + ADP 3-PGA + ATP 3-PGA激酶 2、构象偶联假说：电子的传递过程中形成高能构象，释放能量，使ADP生成ATP。 能说明构象偶联假说的例子是ATP形成或水解与肌动球蛋白的结构变化有关 3、化学渗透假说： 1961年由P.Mitchell提出，此假说得到多数人支持。 化学渗透假说原理示意图 4H+ 2H+ 2H+ 4H+ NADH+H+ 2H+ 2H+ 2H+ ADP+Pi ATP 高质子浓度 H2O 2e- + + + + + + + + + _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 质子流 线粒体内膜 磷酸化 氧化 （1）递H体和递电子体交替排列 （2）复合物Ⅰ、Ⅲ 和Ⅳ中的递H体利用电子传递反应能量将H+泵出内膜 （3）线粒体内膜对H+不通透，造成跨膜H+梯度(质子浓度梯度和电位梯度，合称为质子动力势) （4） H+通过F1-F0-ATPase回流时，释放能量，生成ATP 化学渗透假说内容： （1978年的诺贝尔化学奖） （1）氧化磷酸化的进行要求线粒体内膜完整 （2）将线粒体悬浮于无O2缓冲液，当通入O2 时介质很快酸化