生物技术实践专题一微生物.pptVIP

②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝C/V×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数。 二、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶 是一种复合酶，它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 2．纤维素分解菌的筛选原理 (1)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 (2)纤维素分解菌能增生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。 3．土壤中纤维素分解菌的筛选 (1)方案 土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。 (2)选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 (3)涉及的微生物技术主要有：培养基的制作、无菌操作、稀释涂布平板法、选择培养基的作用、土壤取样等。 2．(2009·宁夏理综，40)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件 外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具 有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、__________ 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养 器皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和____； 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变 性，还能_________________。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计 值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品 稀释的____________。 温度 酸碱度 易培养 生活周期短 灭菌 消毒 损伤DNA的结构 比例合适 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细 菌进行初步的___________________。 (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培 养基应采用的检测方法是_______________________________________________________________ ______________________。 (6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________ 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 鉴定(或分类) 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是 否有菌落产生 灭菌 生物技术实践 实验 要求 5-1? 微生物的利用 ? （1）微生物的分离和培养 （2）培养基对微生物的选择利用 （3）利用微生物发酵来生产特定的产物 掌握程度参考本考试大纲中的： 一、考试的能力要求 2、实验与探究能力 5-2? 生物技术在食品加工及其他方面的应用 ? （1）从生物材料中提取某些特定的成分 （2）运用发酵加工食品的基本方法 （3）植物的组织培养 掌握程度参考本考试大纲中的： 一、考试的能力要求 2、实验与探究能力 （2）按培养基的物理形态分： 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 一 培养基: （3）按培养基的功能分： 基础培养基 选择培养基 鉴别培养基 （1）按培养基的化学成分分： ·天然培养基 ·合成培养基 ·半合成培养基 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 各种培养基的具体配方不同，但一般都包括哪些成分？ 不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质。 注： 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的