饲料中霉菌总数测定方法.docVIP

霉菌总数检测操作规程 1 原理 根据霉菌生理特性，选择适宜霉菌生长而不适宜细菌生长的培养基，采用平板计数法测定霉菌总数。 2 试剂与仪器 2.1 所用器具 三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针、移液器 2.2 仪器：分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅 2.3 所用试剂和培养基 高盐察氏培养基 取高盐察氏培养基109g，加入蒸馏水1L，搅拌加热 至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌30 min，备用。 3、操作步骤 3.1 配制0.85%生理盐水 称取氯化钠8.5g溶于1000mL蒸馏水中。 3.2 锥形瓶加入生理盐水90mL，试管中加入生理盐水9mL，121℃ 3.3 将1000μL枪头、培养皿、5mL枪头、称量勺、带6颗玻璃珠具塞试管，121℃ 3.4 枪头、培养皿置于烘箱103℃烘干。 3.5 对称量房间进行紫外灭菌30分钟，关灯静置60 min。以无菌操作取样品10g于含90mL生理盐水三角烧瓶中，于振荡器上振荡30min，制成1:10的均匀稀释液。 3.6 吸取1:10稀释液10mL注入带玻璃珠的试管，置微型混合器上混合3min。 3.7 用1000μL枪头吸取1:10稀释液1mL，沿管壁慢慢注入含有灭菌生理盐水9mL的试管中，于振荡器上混合均匀，制成1:100的均匀稀释液。 3.8 另取一只1m