氟喹诺酮药物浓度对金黄色葡萄球菌耐药突变株选择的影响资料精.pdfVIP

维普资讯 中国感染与化疗杂志2006年 10月 15日第 6卷第 5期 ChinJInfectChemother，Oct2006，Vol6，No 5 309 · 论 著 · 氟喹诺酮药物浓度对金黄色葡萄球菌 耐药突变株选择的影响 崔俊昌， 刘又宁， 王 睿 ， 梁蓓蓓 摘要 ： 目的 了解氟喹诺酮药物浓度对金葡菌耐药突变株选择的影响。方法 将金葡菌ATCC25923接种于不同浓度环丙 沙星及加替沙星琼脂平皿上 ，根据不同药物浓度平皿上生长的菌落数 ，计算菌落生长 比例 。对不 同药物浓度筛选出的耐药突 变株进行编码拓扑异构酶Ⅳ c亚单位基因parC(grlA)和促旋酶 A亚单位基因gyrA 喹诺酮耐药决定区的PCR扩增和测 序，并测定外排泵抑制剂利血平对环丙沙星和加替沙星 MIC的影响。结果 药物浓度对平皿 中生长的菌落数有 明显影响。 环丙沙星在低 、中浓度主要选择 出主动外排泵介导的非靶位耐药突变株 ，高浓度选择 出GrlA变异的耐药突变株，以Ser一 一 Phe为主 。加替沙星低浓度选择出非靶位及靶位变异菌株 ，而 中、高浓度均选择 出GrlA变异株 ，也 以Ser一8O—Phe为主 。结 论 氟喹诺酮药物浓度对金葡菌耐药突变株菌落数 以及耐药位点的选择都有 明显影响。 关键词 ： 氟喹诺酮 ； 金黄色葡萄球菌； 耐药 ； 防耐药变异浓度 中图分类号：R378．11；R978 文献标识码 ：A 文章编号：1009—7708(2006)05—0309—04 Effectofflu0r0quin0l0neconcentration on theselection ofresistantmutantsof Staph lococcusaureus CUIJun—chang， LJUYou—ning， WANGRui， LIANGBei—bei．(RespiratoryMedicine，TheGeneral HospitalofChinesePeoplesLiberationArmy，Beijing 100853，China) Abstract： 0bjectiveTostudytheeffectoffluoroquinoloneconcentrationontheselectionofresistantmutantsofS．aureHs． M ethodsTheS．aureusstrainATCC 25923wasenrichedinbrothandtheceilswereplatedonM ueller—Hintonagarplatescon— tainingciprofloxacinorgatifloxacin．Coloniesoneachplatewerecountedandtherecoveryofinputceilswascalculated．Quino— loneresistance-determiningregion (QRDR)mutationsofparC (grlA )andgyrAofresistantmutantswereidentifiedbyPCR amplificationandgenesequencing．Theeffectofefflux-pump inhibitorreserpineonM ICsofgatifloxacinandciprofloxacinfor resistantmutantswasdeterminedbyagardilutionmethod．Results Fluoroquinoloneconcentrationhadstrong influenceon the recoveryofresistantcoloniesandtheselectionofresistantallele．ThecoloniesselectedatlOW andmedium concentrationofcip— rofloxacinwerelargelynon—targetmutants，andathighconcentration，Ser一8O PheOrlA mutantsdominated．Non-targetand