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第四章 发酵工业培养基及原料处理 培养基的营养、组成和原料处理 发酵培养基的概念 第一节 发酵营养基质的组成 一、碳源营养 微生物从总体上说几乎可以分解利用地球上的一切有机物,但其碳源谱个体差异较大。总的来说,发酵上常用的碳源集中在糖类、脂类和烃类三种,糖类最常用。 一、碳源营养 葡萄糖 优势:广谱碳源,几乎所有的微生物都能利用 劣势:初糖效应、影响DO,且其代谢对很多发酵产物有干扰 解决方法:流加或连续发酵 其他糖类 果糖>双糖>多糖>有机酸、醇、酯、烃 常用价格便宜的,如淀粉,但需预处理 一、碳源营养 糖蜜 糖蜜(molasses)是制糖工业的下脚料。将提纯的甘蔗汁或甜菜汁熬成带有结晶的糖膏,用离心机分出结晶糖,重复多次,至不能结晶,此母液即糖蜜。 典型糖蜜的成分和性状,见下页表4-3. 一、碳源营养 由于我国制糖工业在南方和北方所用原料不同,所以糖蜜也主要有甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜两种。 糖蜜的品质因不同产地、不同产区土质、不同气候、不同原料品种、不同收获季节、不同制糖方法与工艺条件而有很大差异。 糖蜜主要应用在氨基酸、抗生素、酒精等发酵工业上。 一、碳源营养 脂类 含义:主要指各种长链脂肪酸 常用物质:各种动物油和植物油,如各种菜油、豆油、棉子油、葵花子油、猪油、鱼油等 常用菌种:如解脂假丝酵母等 使用注意事项:乳化问题、供氧问题 一、碳源营养 烃类 常用物质:常以石油各个组分为原料 常用菌种:即“石油微生物”,如热带假丝酵母、解脂假丝酵母、嗜油毕赤氏酵母、脱蜡球拟酵母以及某些假单胞菌等 发酵行业:石油脱蜡、SCP生产 二、氮源营养 凡是能被用来构成菌体物质中或代谢产物中氮素来源的营养物质称为氮源。微生物整体利用的氮源范围则称氮源谱。 象碳源谱一样,微生物的氮源谱也比较广大,但个体间差异较碳源谱小,NCHO型最易利用。 除极少数具有固氮能力的微生物以外,微生物的氮源都来自自然界中的无机氮或有机氮物质,因此我们可以将氮源分为无机氮源和有机氮源两种。 二、氮源营养 无机氮源 常用物质:氨水、铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐等 特点:利用速度快,很多是速效氮源 某些利用后会改变培养基pH值,称这些氮 源为生理酸、碱性物质 氨水简介 缺点:有些微生物不能利用 二、氮源营养 有机氮源 常用物质:主要是各种成分复杂的工农业下脚料,如各种豆粉、玉米粉、棉子饼粉、花生饼粉、各种蛋白粉、鱼粉、蚕蛹粉、某些发酵的废菌丝体粉、酿酒工业的酒糟以及实验室常用的牛肉膏、蛋白胨等等 特点:营养丰富,常为迟效氮源 二、氮源营养 有机氮源 玉米浆 概念:玉米浆是以玉米制淀粉或制糖中的玉米浸泡水制得的。目前主要应用于抗生素工业。 玉米浆由于浸泡使得营养十分丰富 使用注意:酸性(pH值约为4),质量波动 二、氮源营养 尿素 亦称脲,CO(NH2)2,相当于碳酸的二酰氨,外观为白色晶体或粉末,是动物蛋白质代谢后的产物。 应用范围:广泛,尤其在抗生素和氨基酸发酵中 使用注意 中性氮源 含氮量高(46%) 微生物必须能分泌脲酶 营养简单 二、氮源营养 蛋白胨 概念:外观呈淡黄色的粉剂,是具有某种类似肉香的特殊气味,平均分子量在2000左右的氮素混合物。 使用注意 营养成分的波动 一般仅用于实验室 防止吸潮 三、无机盐及微量元素 概念:指除碳、氮元素外其他各种重要元素及其供体。 划分:大量元素(10-3~10-4mol/L) 主要是P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等 微量元素(10-6~10-8mol/L) 主要是Cu、Zn、Mn、Mo和Co等 使用:大量元素:盐;微量元素:有机碳(氮)源、高倍贮液 三、无机盐及微量元素 磷元素 细胞内存在:磷酸基团,以酯键与各种细胞组分相连接 作用: 细胞膜组分 活化糖类分子 共价修饰 桥接核苷酸 组成ATP 三、无机盐及微量元素 常用供体:K3PO4·3H2O、K3PO4、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O等 注意事项: “磷酸盐调节”现象 有机碳(氮)源的使用 三、无机盐及微量元素 硫元素 细胞内存在:多以巯基或杂环硫形式存在 作用: 蛋白质构象形成必需 构成含硫维生素 供体:硫酸盐 注意事项: 有机碳(氮)源的使用 产物含硫的发酵 三、无机盐及微量元素 钙元素 细胞内存在:二价离子(Ca2+)形式 作用: 很多酶的辅因子或激活剂 渗透压调节剂 供体:CaCl2 注意事项: 不要与磷酸盐同时添加 可以用CaCO3作为备用碱 三、无机盐及微量元素 镁元素 细胞内存在:二价离子(Mg2+)形式 作用: 很多酶的辅因子或激活剂 叶绿素组分 供体:MgSO
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