DNA重组技术和基本工具.pptVIP

专题1 基因工程;每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。;为什么人的基因可以导入大肠杆???内？ 为什么人的基因可以在大肠杆菌内表达？ 基因工程基础： （1）DNA的规则双螺旋结构是基因工程的物质 基础； （2）不同生物共用一套密码子是理论基础； （3）运载体和工具酶的发现为基因工程提供了技术基础。;基因工程的产物; 基因工程概念;;问题探讨：;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的关键步骤：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;寻根问底;⒉种类与命名：;磷酸二酯键;O;;限制酶的识别序列：;　;　;什么叫黏性末端？;SmaⅠ;什么叫平末端？;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;……GAATTC…… ……CTTAAG……;基因的针线──DNA连接酶; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;　;二、“分子缝合针” —— DNA连接酶;③类型：;;基因进入受体细胞的载体;三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体;什么是质粒 存在于细菌以及酵母菌等生物中 细菌拟核DNA外(细胞染色体外)能自主复制的裸露的、结构简单、双链环状DNA分子 细菌的质粒比细菌DNA小得多 带有少量基因 常有抗生素抗性基因,使细菌有抗药性 质粒与宿主细胞的关系 质粒的存在对宿主细胞无影响 质粒的复制只能在宿主细胞内完成;常用的载体：质粒;;思考与探究 P7 （2）;3、天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？;1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。 2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。 5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。;4、DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？;1.在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 ;2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因可作为标记基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。;对照组：不添加抗生素;;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程