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WB实验细节详述;一：蛋白定量（实验前处理）;一：蛋白定量（裂解液详述）;一：蛋白定量（原理）;一：蛋白定量（实验过程）;一：蛋白定量（数据处理）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（配胶）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（配胶）;制分离胶时10%AP加入后迅速混匀再加TEMED制胶，沿壁灌注，灌注时尽量不要产生气泡，如有气泡，用移液器将气泡吸出，留出浓缩胶所需空间（梳齿长再加1cm）。
覆盖水层于分离胶溶液上，夏天将制胶器放室温20min，冬天放37度培养箱20min-30min
待分离胶和水层之间会出现清晰界面，表明分离胶充分聚合（可微微倾斜模具，检测凝胶是否聚合），倒掉并用滤纸吸干水
在已聚合分离胶上直接灌注浓缩胶液体，立即插入加样梳（缓慢插入，避免产生气泡）。将凝胶在室温或者37℃静置20-30min（视具体情况而定），直到浓缩胶完全凝固。;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（原???）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（原理）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（装胶）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（上样）;二：聚丙烯酰胺凝胶电泳（电泳）;三：转膜（原理）;三：转膜（PVDF膜）;三：转膜（操作过程）;四：丽春红染色（原理）;四：丽春红染色（过程）;五：封闭（原理）;五：封闭（过程）;六：一抗孵育（查询抗体）;六：一抗孵育（过程）;七：二抗孵育（过程）;八：ECL发光（原理）;八：ECL发光（化学发光成像系统过程）;八：ECL发光（显色曝光过程）;九：WB数据处理;一抗不是唯一特异的
二抗出现非特异结合;背景很深;杂交信号很弱
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