医院人感染h7n9禽流感病毒核酸检测标准操作程序资料精.pdfVIP

医院人感染H7N9禽流感病毒核酸检测 医院人感染H7N9禽流感病毒核酸检测 标准操作程序 标准操作程序 陈 瑜 传染病诊治国家重点实验室 浙江大学附一院检验中心 2013.05.23 2013.05.23 目的 确保人感染H7N9禽流感病毒核酸检测过程标准化、 规范化，避免因不规范操作对检测结果造成的影 响，保证结果的准确性和可重复性 适用范围 医疗机构临床基因扩增实验室按照《关于医院开展 人感染H7N9禽流感病毒核酸检测有关工作的通知》 （卫办医政函〔2013〕383号）和《关于做好医疗 机构人感染H7N9禽流感检测试剂供给保障工作的通 知》（卫发明电〔2013〕29号）有关要求，开展人 感染H7N9禽流感病毒核酸检测工作。 样本种类 尽量采集患者发病早期的呼吸道样本： 上呼吸道样本包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、 咽漱液和鼻洗液； 下呼吸道样本包括痰液、气管吸取物、肺洗液、 肺组织等 尽量在抗病毒药物使用前采集 可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中，以便提高检 出率 患者有下呼吸道样本时，应优先采集 样本种类 已发现H7N9病毒在痰和下呼吸道灌洗液阳性率 高，持续时间长 鼻咽拭子病毒检测阳性率低，持续时间短 痰液标本中病毒能持续 到治疗后第6天，而咽 拭子标本并不能检测到 采集前的准备 采集物品包 采集前的准备 常用的采样液/病毒运输液(VTM） 1. pH 7.4～7.6的Hanks液 2. MEM/DMEM液  若标本需要病毒培养，需在采样液中加入抗菌素，可用青霉素 （终浓度100U/ml）、庆大霉素（终浓度 1mg/ml）和抗真菌 药物（两性霉素B，终浓度 2µg/ml）。  在无菌的带螺旋塑料管分装2-3ml采样液。最好储存在: –20℃； 4℃可放48–96h，室温1–2天。 采样拭子：使用头部为聚酯纤维的病毒采样拭子（鼻咽 型），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄 样本采集 1. 咽拭子  用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁 桃体及咽后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中， 尾部弃去，旋紧管盖，贴上标签。 √ × 样本采集 2. 鼻拭子  将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻 腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤 维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上 述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃