高产微生物油脂菌株培养基及发酵条件优化方法.docxVIP

课堂报告名称：高产微生物油脂菌株培养基及发酵条件优化方法 一、课堂报告依据的知识背景 1?培养基及其分类 人类想要研究利用微生物，就必须先培养微生物。培养微生 物要有适合微生物生长繁殖的环境条件，还要适宜的营养条 件。由人工配置的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营 养基质，称作培养基。 ?按用途分类：增殖培养基；选择培养基；鉴别培养基。 ?按状态分类：液体培养基；固体培养基；半固体培养基。 ?按化学成分分类：天然培养基；合成培养基；半合成培养基。 ?按目的分类：种子培养基；发酵培养基。 1）.培养基包含成分 a） 水：水分是微纶物重要组成部分，微工物不能脱离水而牛. 存，微生物所需的营养也只有溶于水才能很好地吸收，水 利于调节细胞温度，保持细胞生活环境的温度恒定。水分 为两种状态，自由水和结合水。前者以游离态存在，是细 胞内的溶剂；后者与细胞内其他成分结合，不易蒸发，不 冻结，不渗透，也不能作为溶剂。 b） 碳源：提供为生物细胞组成和代谢产物中碳素来源的物质。 提供微生物生长繁殖所需的能量。 碳源分类很多，无机碳化合物有二氧化碳、碳酸盐等；有 机含碳化合物，如糖类、醇类、有机酸、蛋白质及其分解 产物。 C）氮源：可提供为生物细胞组成和代谢产物中氮素来源的物 质。氮源用来合成氨基酸和碱基进而合成蛋口质、核酸等 细胞成分以及含氮代谢产物。 氮源分类： 1 ?分子态氮，存在大气中，仅有少数微生物可以利用； 2?无机态氮，如鞍盐、硝酸盐等，多数微生物可以利用； 3?有机态氮，蛋白质及各种分解产物、尿素、卩票吟碱、 卩密噪碱等。 d）能源：提供微生物生命活动过程中所需的能量来源的物质。 异养微生物能源为碳源；自养微生物能源是日光。 c）生长因子：微生物不能自行合成，但生命活动又不可缺少 的微量有机营养物质。 功能：构成细胞的组成成分，如卩票吟、囉噪是核酸的组成 成分；调节代谢，维持正常的生命活动。 自养微生物不需要生长因子，能自行合成；异养微生物有三 种情况：有些异养微生物需要生长因子，如谷氨酸的短杆菌, 需要添加生物素才能使菌体生长良好；有些不需要生长因子; 有些不但不需要还能在自身积累某些维生素，如肠道微生物 分泌大量维生素供机体吸收利用，大肠杆菌合成维生素Ko f）无机盐类：微生物生长过程中不可缺少的营养物质。从量 的角度分主要元素和微量元素两大类。前者指磷钠硫钙镁 铁等；后者锌镒乍冃钻等。 作用：构成细胞组成成分，磷是核酸的组成元素之一；做 酶的组成成分或酶的激活剂，铁是过氧化氢酶细胞色素氧 化酶的组成成分，钙是蛋白酶激活剂；调节微生物的生长 的物理条件，渗透压、氢离了浓度、氧化还原电位等；作 为某些自养微生物的能源，如硫细菌以硫作为能源。 碳氮比：是指有机物中碳的总含量与氮的总含量的比，适 当的碳氮比例，有助于微半物发酵分解。碳氮比过高和过 低都不利于细胞生长和外源蛋白表达和积累，过低导致菌 体提早自溶；过高导致细菌代谢不平衡，最终不利于产物 的积累。即使碳氮比处在合适水平，碳源和氮源浓度过高 和过低也不利于细胞生长和外源蛋白表达和积累，浓度过 高，细胞在发酵过程后期生长缓慢，代谢废物产生较多， 最终使得菌体代谢异常，影响外源蛋白合成；浓度过低， 培养基所能提供的营养物质有限，影响细胞的繁殖。因此 培养基除了氮源碳源浓度适宜，还需要二者比例关系确 定。 PII值：各类微生物生长的PII值不尽相同，环境中的pll值 对微生物的生命活动影响很大，主要作用在于：引起细胞 膜电荷的变化，从而影响了微生物对营养物质的吸收；影 响代谢过程中酶的活性；改变生长环境中营养物质的可给 性以及有害物质的毒性。每种微生物都有其最适pH值和 一定的pH范围。在最适范围内酶活性最高，如果其他条 件适合，微生物的生长速率也最高。大多数细菌、藻类和 原生动物的最适pH为6. 5-7?5,在pH 4-10之间也可以生 长；放线菌一般在微碱性即pH7. 5-8最适合；酵母菌、霉 菌则适合于PH5-6的酸性环境，但生存范围在pHl. 5-10 之间。有些细菌甚至可在强酸性或强碱性环境中生活。。 i） 渗透压：恰好能够阻止水分子通过半透膜从浓度较低的溶 液移向浓度较高的溶液的在较高浓度溶液的液面上施加 的额外压强称为渗透压。培养基内物质浓度要合适。 j） 氧化还原电位：一般，好氧微生物在氧化还原电位为正时 都能生长，而厌氧微生物要求氧化还原电位为负值，其中 严格厌氧微生物要求氧化还原电位在-400mV以下 2） ?培养基配制的基本原则 要确定研究目的，明确微生物的营养类型，同时应该了解微生物 的类群、生活环境； 应当查阅大量文献，总结借鉴前人工作经验； C.具体问题具体分析，本着既要满足微生物的生长繁殖或积累大量 代谢产物 d?要求，同时又要降低成本的原则，通