朵丽蝶兰二氢黄酮醇还原酶基因DtpsDFR的克隆与表达分析.pdf

网络出版时间：2014-09-26 15:02 网络出版地址：/kcms/doi/10.11844/cjcb.2014.10.0160.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(10): DOI: 10.11844/cj cb.2014.10.0160 DtpsDFR 朵丽蝶兰二氢黄酮醇4-还原酶基因 的 克隆与表达分析 黄敏玲1,2,3* 钟淮钦1,2,3 吴建设1,2,3 樊荣辉1,2,3 林 兵1,2,3 1 2 ( 福建省农业科学院作物研究所, 福州350013; 福建省农业科学院花卉研究中心, 福州350013; 3福建省特色花卉工程技术研究中心, 福州350013) 摘要 二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reduetase, DFR)基因是花色素苷合成途径中 ‘ ’ 的一个关键酶基因。该研究利用RT-PCR和RACE技术从朵丽蝶兰满天红深红色花瓣中克隆获得 DFR DtpsDFR 一个 基因,命名为 。该cDNA序列全长1 286 bp, 编码378个氨基酸。氨基酸序列分析 表明, DtpsDFR编码的蛋白与Bromheadia finlaysoniana 、文心兰、大花蕙兰、石斛兰等兰科植物的 DFR蛋白同源性均在76%以上, 含有1个FR_SDR_e特征结构域, 存在NADPH结合基序和底物特异 性结合基序, 属于NADB_Rossmann超家族; 系统进化树显示, DtpsDFR与Bromheadia finlaysoniana 的DFR蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果显示, DtpsDFR基因的表达量随着花的发 育逐渐降低,凋谢期微量表达; 在花瓣、萼片中的表达量高于唇瓣, 在叶片和根中微量表达。 关键词 朵丽蝶兰; DFR基因; cDNA克隆; 基因表达 Cloning and Expression Analysis of Dihydroflavonol-4-Redutase Gene DtpsDFR in Doritaenopsis Hybrid Huang Minling1, 2, 3*, Zhong Huaiqin1, 2, 3, Wu Jianshe1, 2, 3, Fan Ronghui1, 2, 3, Lin Bing1, 2, 3 1 ( Institute of Crop Sciences, Fujian Academ