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二、酶工程 酶工程:指酶制剂在工业上的大规模生产和应用。 1、化学酶工程: 由酶学与化学工程技术相结合而形成。 通过化学修饰、固定化处理、甚至化学 合成法等手段改善酶的性质,以提高催 化效率及降低成本。 酶学发展及动向 固定化酶 概念:将分离纯化得到的水溶性酶用物理或化学的方法处理,使酶与载体(琼脂糖、聚丙烯酰胺等)连接,作成具催化活性的水不溶的酶。 应用:此技术可提高酶的稳定性和使用寿命;使反应过程连续化、自动化,简化工艺;提高产品质量。 此技术以广泛用于工农业生产、医药卫生、环境保护、生物化工等方面。 酶学发展及动向 某些作为药物使用的酶 固定化酶的优点: 1)、重复使用 2)、不污染产物 3)、有利于连续化和自动化生产 4) 、节约能源和设备投资 缺点:1)、酶经固定化后活力降低 2)、对大分子底物和气体底物不利. 酶固定化方法: 1)、吸附法 2)、共价偶联法 3)、包埋法 4)、交联法固定化 酶的应用:1)、固定化葡萄糖异构酶将葡萄糖转变为果糖 2)、固定化木瓜蛋白酶澄清啤酒 2、生物酶工程: 是在化学酶工程基础上发展起来的,是以酶学和DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。包括: 1)用DNA重组技术大量生产酶; 2)对酶基因进行修饰,产生突变酶; 3)设计新的酶基因,合成自然界不曾有过的、性能稳定、催化效率更高的新酶。 酶学发展及动向 1、酶能加速化学反应的进行是由于哪一种效应 A、向反应体系提供能量 B、降低反应的自由能变化 C、降低反应的活化能 D、降低底物的能量水平 E、提高产物的能量水平 2、已知某种酶Km值为0.05mol/L,试问要使此酶所催化的反应速度达最大反应速度的80%时底物浓度应是多少 A、0.04mol/L D、0.05 mol/L B、0.8 mol/L E、0.1 mol/L C、0.2 mol/L 习 题 习 题 3、一个酶作用与多种底物时,其天然底物Km值应是 A、增大 B、与其他底物相同 C、最小 D、居中间 E、与Km相同 4、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制效应是 A、Vmax降低,Km值不变 B、Vmax降低,Km值降低 C、Vmax不变,Km值增加 D、Vmax不变,Km值降低 E、Vmax降低,Km值增加 答案 1、C 2、C 3、C 4、C 5、 C 习 题 名词解释 抗体酶 酶的活性中心 固定化酶 同工酶 酶原 米氏常数 简答题: 1、试述使用酶作催化剂的优缺点 不可逆抑制剂 有机磷、烷化剂:作用于Ser、Thr的-OH; 如:有机磷农药、二战毒气等作用于催 化乙酰胆碱水解的胆碱酯酶,引起 一系列神经中毒症状; 临床用羟肟酸缓解症状。 常用农药:有机磷农药、有机氯农药、有机汞农药 抗菌素: 酶的影响因素 青霉素分子 β-内酰胺环与噻唑啉环融合 N-(2-羟基)苯氧乙酰胺做前体 2)可逆抑制 I与E的结合往往是非共价键结合,是可逆结合,可用透析法除去I。 可逆抑制根据I与S的关系分三类: 竞争性抑制: 非竞争性抑制: 反竞争性抑制: 酶的影响因素 ①竞争性抑制 I 在分子结构上与S类似, I与S竞争性 与E结合,使酶促反应速度下降。 但,若[S]高,则此效应减小。 酶的影响因素 反应通式: E + S S E E+P + I EI 特点:I与S结构类似;抑制程度取决于 [I]和[S]以及与E的亲和力;可通过增加[S]来减轻或解除抑制。 竞争性抑制机理: I占了S的位子; E与I或S结合后构 象发生变化, 产生不利于另一个结合的构象。 应用: 药物设计的依据。 如磺胺、 对氨基苯甲酸(PABA) 对氨基苯磺酰胺 磺胺类药物的抑菌机制: 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶磷酸酯 + 对氨基苯甲酸 + 谷氨酸 二氢叶酸
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